荧光光谱法测定未知液中维生素B6地含量.doc

word
word
1 / 1
word
F-4500荧光光谱仪测定水样中维生素B6的含量
一、目的要求
6的根本原理和方法。
-4500荧光光谱仪的使用方法。
二、方法原理
对同一物质而言，荧光强度F与该物质的word
word
1 / 1
word
F-4500荧光光谱仪测定水样中维生素B6的含量
一、目的要求
6的根本原理和方法。
-4500荧光光谱仪的使用方法。
二、方法原理
对同一物质而言，荧光强度F与该物质的浓度C有以下关系:
F=KC
即在较低的浓度情况下，荧光强度与该物质的浓度C呈线性关系。
三、实验步骤
1. 标准系列溶液的配制
100 ug/mL维生素B6标准溶液：。准确移取10ml该溶液稀释至100ml。
6标准溶液，并分别移入pH= ml，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
2. PH＝ Na2HPO4-柠檬酸缓冲液
取Na2HPO42HPO4溶液。
，移入100ml容量瓶，稀释至刻度，摇匀，即成 。
将Na2HPO4与柠檬酸溶液按6:1的体积比配成缓冲溶液250ml。
3. 绘制维生素B6荧光光谱
将激发狭缝和发射狭缝分别设置为5nm和5nm，扫描速度设置为1200nm/min。用一号溶液，以=390 nm为发射波长，在260~360 nm波长X围内扫描激发光谱，找出最大激发波长；以=326nm为激发波长，在350~450nmX围内扫描荧光光谱，找出最大发射波长。
4. 标准溶液的测定
设置适当的仪器参数〔最大激发波长=326nm，最大发射波长=390 nm〕测量标准系列溶液的荧光强度。
5. 未知试样的测定
取未知液与标准工作曲线一样的条件，测量试样的荧光强度。
四、结果处理
。
，从标准工作曲线上求得其浓度。