细菌内毒素凝胶试验法.ppt

细菌内***凝胶试验法
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一、试验程序
1、试验准备：试剂、仪器及用具等；
2、确定药品细菌内***限值（L）；
3、选择鲎试剂灵敏度（λ）；
4、计算供试品最大有效稀释倍数（MVD）和最低有效浓ml→→；
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六、鲎试剂灵敏度复核试验
1）取试管架，、、、、、、；
2）、、 、、、、；
3）另取一支刻度吸管或吸头，***标准溶液按，，在旋涡混合器上混合30s，***素标准液；
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六、鲎试剂灵敏度复核试验
4）以后每步稀释需另一支刻度吸管或吸头，***，在混合器上混合30s，、、、、、***标准溶液。如下图所示。
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六、鲎试剂灵敏度复核试验










BET水
CSE





15min
30s
30s
30s
30s
30s
30s
20EU/ml







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六、鲎试剂灵敏度复核试验
4、细菌内***（TAL）的准备
（1）取TAL5支，用砂轮在安瓿颈部划痕，用75%的酒精棉球擦拭后，折断（避免玻璃屑落入安瓿内）；
（2），轻轻转动瓶壁使内容物全部溶解（避免产生气泡），将复溶后的TAL分别吸取移至一玻璃瓶内混合均匀；
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六、鲎试剂灵敏度复核试验
（3）取试管架一个，、、、、NC顺序做标记后，插入10×75mm反应试管，各内***浓度平行4管，NC平行2管；
（4）。
5、加样：，***标准溶液。如下图。
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六、鲎试剂灵敏度复核试验

TAL
CSE




NC









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六、鲎试剂灵敏度复核试验
6、封口：用封口膜封口，或用医用胶布在酒精灯火焰上通过1～2次后封口，轻轻混匀（避免产生气泡），将反应连同试管架放入37±1℃恒温水浴箱（或将试管直接放入反应器）中，保温60±2分钟（保温过程中应避免震动而影响凝胶的形成）。
7、结果记录：将反应管从水浴中轻轻取出，缓缓倒转1800,若管内凝胶显示坚实不变形者为阳性，记录为“+”；若管内无凝胶形成，或虽有凝胶但不能保持完整，从管壁滑脱者，均判为阴性，记录为“-”。如下图。
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六、鲎试剂灵敏度复核试验