暗紫贝母组织培养及其生物碱积累研究.pdf

西华大学学位论文独创性声明作者郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下进行研究工作所取得的成果。尽我所知,除文中已经注明引用内容和致谢的地方外, 本论文不包含其他个人或集体已经发表的研究成果,也不包含其他已申请学位或其他用途使用过的成果。与我一同工作的同志对本研究所做的贡献均已在论文中做了明确的说明并表示了谢意。若有不实之处,本人愿意承担相关法律责任。学位论文作者签名:硝搬指导撕签名:纠碍日期:,p,,.6.,参日期:-2移fl,‘、I毛西华大学学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,在校攻读学位期间论文工作的知识产权属于西华大学,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅,西华大学可以将本论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复印手段保存和汇编本学位论文。(保密的论文在解密后遵守此规定) \, 学位论文作者签名:鹏稚指导教师签名:—≤≥——订彳乏f 日期:≯:.(Fritillaria unibracteata Hisao )为四川重要的道地药材之一, 含有多种生物碱、皂苷及人体必需的微量元素,其干燥鳞茎具有清化热痰、润化燥痰、止咳、散结消肿之功效,历来备受中医的重视。因其独特生长环境和较长的生长周期, 产量很少,价格昂贵,人为过度采挖已造成该品种的野生资源濒临灭绝,而通过植物组织培养的方法可有效解决此问题。本实验以新鲜的暗紫叹母鳞茎为外植体,采用经过低温预处理和添加一定浓度维生素C(Vc)的防止霉变、褐变方法,在不同激素配比浓度下考察其愈伤组织和不定芽的诱导情况。依据最佳诱导培养条件进行外植体离体培养,在培养过程中分不同时间段取样,以贝母甲素为对照品,采用HPLC法测定组培过程中不同生长时期产物生物碱的积累量。组织培养实验结果显示:%、愈伤组织最高诱导率为 %,以此确定出最佳的培养体系条件为:低温预处理48h、光照16h/d、MS() + mg/L+ mg/L+ g/L。不同生长时期生物碱的积累量实验结果表明:组培的过程中不定芽的有关生物碱积累呈上升趋势,最高积累量为原种鳞茎的1倍以上,以此确定出组培过程中有关生物碱的最佳积累期为32天左右。暗紫贝母组织培养优化体系的建立,有利于野生川贝母的资源保护和开辟药材资源新途径:组培过程中有关生物碱积累研究,对研究和开发其次生代谢产物、实现中药的现代化进程有蘑要作用。关键词:暗紫贝母;不定芽:愈伤组织:诱导率;最佳时期西华大学硕士学位论文 Abstract Hisao as one ofthemostgenuine medicinal materials in Sichuan province contains various alkaloid and saponinsand essential traceelements in humanbody,the dry bulbsofthisplant are used ascleating away heatandeliminatingsputum, relievingcough,anti—inflammation andrelieving pain,which hasalways great concerns on the traditionalchinese the factorsofunique growth environment,longer growth cycle,the yield islower and theprice is s0 ,because ofthemankind’S excessively exploiting,the wild resources of thisplant has turned into allendangered method oftissueculturecould solvetheseproblems. Explants fromthe肌sh bulb—scalesections were firstpretreated by low temperature and added acertainconcentration Vc tocontrol moldy the induction rate ofthe callusa