生理学实验 第五章 血液.doc

第五章血液
血液由血浆和血细胞组成,在心血管系统内流动。血细胞包括红细胞、白细胞和血小板三类细胞。其中,红细胞具有通透性、可塑变形性、悬浮稳定性和渗透脆性的生理特性。
正常情况下,皮肤毛细血管或小血管破损后引起的出血在几分钟内就会自行停止,即生理性止血,生理性止血过程包括血管挛缩、血小板血栓和纤维蛋白凝块的形成与维持三个时相。
血型是指红细胞膜上特异抗原的类型,输血是临床治疗的重要手段之一,要确保输血安全,必须在输血前验血型和交叉配血。
因此,根据血液的这些生理特点,选取了以下八个实验内容。
血液的基本组成------------------:血细胞计数
红细胞的生理特性---------------:氰化高铁血红蛋白测定法
:红细胞渗透脆性试验
:红细胞沉降率的测定
生理性止血------------------------:出血时间测定
:凝血时间测定
:血液凝固
血型与输血原则------------------:ABO血型鉴定与交叉配血
血细胞计数
【目的】。
,并通过计算人体单位容积血液内的红细胞、白细胞数目以学习血细胞计数的原理和方法。
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【原理】人类的血液由血浆和血细胞组成。血细胞分为红细胞、白细胞和血小板三类。要计数细胞的数目,必须要排除其它细胞的影响,但是由于红细胞数目纵多,在进行红细胞计数时,并不必要破坏其它细胞,而白细胞和血小板则要在计数时排除红细胞的干扰,所以在进行计数白细胞和血小板时,采用的稀释液均可破坏红细胞。红细胞(Erythrocyte)是血液中数量最多的一种血细胞,由于数目纵多,而难以直接计数。测量红细胞数目可按照稀释原理测定,例如可由静脉推注一定量的用同位素标记的红细胞,待与体内的红细胞完全混合后,抽血以测定标记的红细胞稀释的倍数,即可计算出红细胞总量。亦可用稀释液将血液稀释后,滴入血细胞计数板(Blood cell counting chamber)内,在显微镜下计数一定容积的稀释血液中的红细胞数,再将所得结果换算为1L血液中的细胞个数,这就是血细胞计数板法。白细胞、血小板的计数原理与红细胞计数(Erythrocyte count)相同,但所采用的稀释液及所用稀释倍数不同。
【实验对象】人的血液。
【实验器材和药品】血细胞计数板、显微镜、采血针、血红蛋白吸管(Hemoglobin pipet)、小试管(10×75cm)、1cm刻度吸管、细玻璃棒;75%酒精(消毒用)、消毒棉球;蒸馏水、95%酒精(洗吸管用)、乙醚、红细胞稀释液、细胞稀释液。
【实验步骤及观察项目】
一、熟悉血细胞计数板的构造
血细胞计数板由优质厚玻璃制成(见图5-1)。计数板的中央部分有四条沟,形成三条隆起,两边较窄的隆起供搁盖玻片用;中央较宽的隆起部分,刻有一个或两个计数室,用来计数血细胞。。。
图5-1 血细胞计数板
血细胞计数板的种类很多,但其基本原理相同。
图5-2 改良牛鲍尔(Neubauer)氏血细胞计数室
临床常用改良牛鲍尔(Neubauer)氏计数板(见图5-2)。在低倍显微镜下,可见每一计数室用双线分成9个大方格,。其中,四角上的四个大方格用单线划分为16个中方格()。中央的一个大方格用用双线等分为25个中方格()。每个中方格又被单线分为16个小方格。中央的大方格供红细胞计数用。四角的四个大方格供白细胞计数用。
二、仪器洗涤
实验前应先将血红蛋白吸管和血细胞计数板洗净、干燥。洗涤血红蛋白吸管时先重复吸入并吹出蒸馏水数次,使管内清洁。再吸入95%酒精清洗两次,以除去管内水分。最后,吸入乙醚1~2次以除去酒精。如果吸管内存有凝血丝时,切不可用酒精冲洗,可置于1%氨水或45%尿素溶液中浸泡,待血丝溶解脱落后用流水清洗,再用上法洗涤干净。计数板在用自来水和蒸馏水相继洗净后,即用丝绢或擦镜纸轻轻拭干,切不可用酒精或乙醚洗涤,以免损坏计数板上的刻度,应小心以防破裂。
三、采血及稀释
取小试管两支,用刻度吸管分别准确加入红细胞稀释液2ml()、。采血部位一般选择左手无名指指端侧面或耳垂。用75%酒精棉球擦拭采血部位进行消毒。待干后用左手的拇指和中指固定采血部位,右手持消毒过的采血针迅速刺入组织,深约2~3mm,待血液自然流出后用干棉球将第一滴血擦去(为什么?因第一滴血混有组织液,影响计数的