血管形成抑制因子HIAF_1的克隆及其抗肿瘤作用.pdf

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中华肿瘤杂志 2000 年 1 月第 22 卷第 1 期 Chin J Oncol , January 2000 , Vol 22 , No. 1 · 19 ·
·基础研究·
血管形成抑制因子 HIAF 1 的克隆及其
抗肿瘤作用
郭文忠杨治华刘军孙立新陈凤
【摘要】目的克隆和表达一种新的血管形成抑制因子,并研究其抗肿瘤活性。方法应用逆
转录聚合酶链反应从人胎儿肝脏组织中克隆到一种新的血管形成抑制因子( human inhibiting
angiogenesis factor 1 ,HIAF 1) ,经测序后克隆到表达载体 pET30a ( + ) 上,在 E. coli BL21∶DE3 菌中表达。
用 MTT 法体外检测 HIAF 1 对内皮细胞的作用,采用小鼠乳癌自发性肺转移模型 IVTA2 MA 891 ,体内
研究重组蛋白对肿瘤血管形成的作用和抑瘤作用。结果从胎儿肝脏组织中首次克隆到人源血管形
成抑制因子 HIAF 1 ,经测序为人胶原ⅩⅧC 末端的一部分。在 E. coli 细胞中高效表达了该因子的重
组蛋白,蛋白表达量为 88 mg/ L 。体外实验表明 HIAF 1 能抑制内皮细胞的增殖,IC50 值为 7. 5μg/ ml 。
动物实验表明该重组蛋白能够显著抑制肿瘤血管形成,原发瘤的生长(抑瘤率为 46. 6 %) 及肿瘤的转
移(抑制转移率为 68. 9 %) 。结论成功的克隆了血管形成抑制因子 HIAF 1 ,其能够抑制肿瘤血管的
形成,在肿瘤的治疗中显示出良好的应用前景。
【主题词】血管形成抑制因子 1 ;肿瘤血管形成;基因克隆;肿瘤转移
Cloning and antitumor activity of angiogenesis inhibitor HIAF 1 GUO Wenzhong , YANG Zhihua , LIU Jun ,
et al. Cancer Institute ( Hospital) , Chinese Academy of Medical Science , Peking Union Medical College , Beijing
100021 , China
【Abstract】 Objective A new angiogenesis inhibitor HIAF 1 (human inhibitor angiogenesis factor 1) was
cloned , expressed in E. coli and its antitumor activity was studied. Methods HIAF 1 was amplified by RT PCR
from human fetal liver tissue ,then cloned into pET30a ( + ) vector and expressed in E. coli BL21 : DE3 after
sequencing. In vitro en