高中生物实验总结材料.doc

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高中生物实验总结
实验一 ：利用***绿和吡罗红混合染色剂将细胞染色，可以显示DNA和RNA在细胞中的分布；***绿和吡罗红对DNA和RNA的亲和水滴中，用吸水纸吸去装片中的水。
干种子要浸泡3~4小时，新花生的浸泡时间可缩短。
因为浸泡时间短，不易切片；浸泡时间过长，组织较软，切片不易成形。切片要尽可能薄些，便于观察。
在子叶薄片上滴2~3滴丹Ⅲ或丹Ⅳ染液，染色1分钟。
染色时间不宜过长。
 
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用吸水纸吸去薄片周围染液，用50%酒精洗去浮色，吸去酒精。
 
酒精用于洗去浮色，不洗去浮色，会影响对橘黄色脂肪滴的观察。同时，酒精是脂溶性溶剂，可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。
用吸水纸吸去薄片周围酒精，滴上1~2滴蒸馏水，盖上盖玻片。
 
滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。
低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处，可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒。
装片不宜久放。
时间一长，油滴会溶解在乙醇中。
3、蛋白质的检测
（1）试剂：双缩脲试剂（A液：，B液：）
（2）步骤：试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL，摇匀→加双缩尿试剂B液4滴，摇匀→观察
操 作 方 法
注 意 问 题
解 释
制备组织样液。
（浸泡、去皮研磨、过滤。）
 
黄豆浸泡1至2天，容易研磨成浆，也可购新鲜豆浆以节约实验时间。
鉴定。加样液约2ml于试管中，加入双缩脲试剂A，摇匀；再加入双缩脲试剂B液3~4滴，摇匀，溶液变紫色。
A液和B液也要分开配制，储存。鉴定时先加A液后加B液。
 
CuSO4溶液不能多加。
先加NaOH溶液，为Cu2+与蛋白质反应提供一个碱性的环境。A、B液混装或同时加入，会导致Cu2+变成Cu ( OH ) 2沉淀，而失效。
否则CuSO4的蓝色会遮盖反应的真实颜色。
可用蛋清代替豆浆。
蛋清要先稀释。
如果稀释不够，在实验中蛋清粘在试管壁，与双缩脲试剂反应后会粘固在试管壁上，使反应不容易彻底，并且试管也不易洗干净。
附：淀粉的检测和观察
用试管取2ml待测组织样液，向试管滴加2滴碘液，观察颜色变化。
碘液不要滴太多
以免影响颜色观察
4、考点提示：
（1）常见还原性糖与非还原性糖有哪些？ 葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖；淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原（2 )还原性糖植物组织取材条件？
含糖量较高、颜色为白色或近于白色，如：苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。
（3)研磨中为何要加石英砂？不加石英砂对实验有何影响？
是为了使研磨更充分。不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少，使鉴定时溶液颜色变化不明显。
（4）斐林试剂甲、乙两液的使用方法？混合的目的？为何要现混现用？ 斐林试剂甲和斐林试剂乙直接反应生成酒石酸络铜离子，酒石酸络铜离子和可溶性还原糖在加热条件下反应产生砖红色沉淀。斐林试剂甲和斐林试剂乙混合后会因酒石酸有一定的还原性而自发地缓慢产生氧化亚铜沉淀，而氧化亚铜是砖红色沉淀，这就会给实验带来误解。因此斐林试剂一般为现用现配。
（5)还原性糖中加入斐林试剂后，溶液颜色变化的顺序为：
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浅蓝色 棕色 砖红色
（6）花生种子切片为何要薄？ 只有很薄的切片，才能透光，而用于显微镜的观察。
（7）转动细准焦螺旋时，若花生切片的细胞总有一部分清晰，另一部分模糊，其原因一般是什么？ 切片不均匀。
（8）脂肪鉴定中乙醇作用？ 洗去浮色。
（9）双缩脲试剂A、B两液是否混合后用？先加A液的目的。怎样通过对比看颜色变化？
不能混合；先加A液的目的是使溶液呈碱性；先留出一些大豆组织样液做对比。
实验三 观察叶绿体和细胞质流动1、材料：新鲜藓类叶、黑藻叶或菠菜叶，口腔上皮细胞临时装片
2、原理：叶绿体在显微镜下观察，绿色,球形或椭球形。
用健那绿染液染色后的口腔上皮细胞中线粒体成蓝绿色,细胞质接近无色。
知识概要： 取材 制片 低倍观察 高倍观察
考点提示：（1)为什么可直接取用藓类的小叶，而不能直接取用菠菜叶？
因为藓类的小叶很薄，只有一层细胞组成，而菠菜叶由很多层细胞构成。
（2）取用菠菜叶的下表皮时，为何要稍带些叶肉？
表皮细胞除保卫细胞外，一般不含叶绿体，而叶肉细胞含较多的叶绿体。
（3)怎样加快黑藻细胞质的流动速度？最适温度是多少？
进行光照、提高水温、切伤部分叶片；25℃左右。（4）对黑藻什么部位的细胞