小鼠骨髓多染红细胞微核试验氟化钠.pptx

小鼠骨髓多染红细胞微核试验
受试物：***化钠
北京大学公共卫生学院 毒理学课程小组学****br/>小鼠骨髓多染红细胞微核试验***化钠
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微核试验
惯用致突变试验，细胞遗传损伤指标之一，可用于染色体断裂剂和纺锤体损伤剂检测
化学致突量组
*50%=
中剂量组
*1/2= 或*1/4=28mg/kg
低剂量组
*1/2= 或*1/4=7mg/kg
阳性对照组
环磷酰***
120mg/kg
1/2
1/4
1/8




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NaF:90mg
8ml

4ml
4+4ml

4ml
4+4ml

三. 染毒路径：灌胃
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四. 染毒次数及骨髓采样时间
一次染毒、间隔24小时两次染毒、屡次染毒
应于最大敏感期取样（预试验）
此次实****采取一次染毒，24小时后取样测定
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操作步骤
24小时后
制片
染色
镜检
染毒
取材
取骨
擦净血污、剔去肌肉
剪去骨骺端
小牛血清
混匀、推片
吹干
甲醇中固定2min
Giemsa染色液染色10-15min
pH=
pH=
冲洗、晾干
镜检、细胞计数
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镜检
先在低倍镜下观察染色及细胞分散情况，再以油镜计数
每例样本计数1000个PCE，统计有微核细胞数，一个细胞中有几个微核时，记为一个有微核细胞。
再计数200个红细胞，统计PCE在总红细胞（PCE+NCE）中百分比，作为对细胞毒性指标
多染红细胞 PCE
正染红细胞 NCE
微粒
浅兰色
胞浆呈颗粒状
油画
淡红色
胞浆呈均质状
水彩画
圆形或椭圆形
边缘光滑
染色与有核细胞核一致，紫红色
大小约为红细胞1/20-1/5
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MN
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MN
NCE
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图 1 ：正常嗜多染红细胞 PCE （× 400 ）
图 2 带微核嗜多染红细胞 MNPCE （× 400）
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结果分析与评价
受试物
剂量（mg/kg）
各受试小鼠1000个受检细胞中含微核细胞数
总计
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
NaF



水

环磷酰***
120
受试物
剂量（mg/kg)
受检细胞总数（个）
含微核细胞数（个）
平均微核千分率（‰）
标准误
NaF

1000

1000

1000
水

1000
环磷酰***
120
1000
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结果分析与评价
受试物
剂量（mg/kg）
各受试小鼠200个红细胞中含PCE数量
总PCE
总PCE/
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
NaF



水

环磷酰***
120
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结果分析与评价
用统