北京康为世纪生物科技有限公司实时荧光定量PCRReal Time Quantitative PCR1内容?miRNA的特点及检测?荧光定量PCR检测2microRNA3?长度20~24nt 单链小分子RNA?与目标基因3’端非编码区的识别位点相结合?导致目标基因mRNA分子稳定性下降,半衰期变短,或mRNA分子结构变化(5‘脱帽),从而表达水平下降。3’AAAAAAAA5’capmiRNA作用靶点编码区mRNAmicroRNA分子功能4microRNA 的来源5miRNA前体与成熟体6靶点识别–不严格互补配对?一个miRNA可调节多个基因?一个基因可受多个miRNA调控?60%人类蛋白基因受miRNA调控7miRNA 与siRNA的异同?分子形式无区别,都是由Dicer产生的~22nt小分子?分子功能近似,都导致目标基因表达水平下降,但通常siRNA效果更剧烈?产生来源不同–miRNA有其基因,内源性表达–siRNA多数情况下为人工外源导入8miRNA siRNAmiRNA 与siRNA的异同9miRNA 检测与定量经典方法:放射标记Northern杂交10
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