早期心肌缺血死后诊断法医学应用研究.pdf

讨论?????????????????????????·115小结?????????????????????????·117参考文献???????????????????????·118第四部分免疫组化诊断指标在人体尸检心脏标本的检测前言?????????????????????????·120120日IJ舌????’???????’?????’??’??????材料与方法??????????????????????·120结果?????????????????????????·121附图?????????????????????????·124附表?????????????????????????·129讨{仑?????????????????????????·130小结?????????????????????????·132参考文献???????????????????????·132结{仑?.·???????·??,???????·???????·?·135综述早期心肌缺血死后诊断研究进展?????????·136致谢???????????????????????????·152个人简历?????????????????????????·153中文摘要早期心肌缺血死后诊断的法医学应用研究摘要心源性猝死(suddencardiacdeath,SCD)系指由于心脏原因所致的突然、意外的自然死亡,占***猝死原因的首位。在引发SCD的原因中,急性心肌缺血(acutemyocardialischemia,AMI)是最主要的原因,由于短暂的(冠状动脉痉挛)或持续的(冠状动脉闭塞)的急性心肌缺血后,冠状动脉血流量降低,心肌氧等物质供应不足,代谢产物清除减少,引起心脏电生理活动紊乱和/或心肌机械收缩功能障碍,导致大多数病人常在发病后6小时内死亡,甚至lh内死亡。心肌缺血后至少需要6小时在皿染色下才会出现光镜的形态学改变(如凝固性坏死、多灶性心肌纤维波浪样变、核固缩、收缩带坏死、炎细胞浸润等)。而在法医学实践中,早期心肌缺血(earlymyocardialischemia,EMI)猝死者多在心肌缺血发生后6小时内死亡,死后常规检查除可见冠状动脉及其分支存在不同程度的动脉粥样硬化外,由缺血性损伤因素所致的病理形态学改变极难检出,使早期心肌缺血的死后诊断成为法医病理学鉴定的难点。多年来国内外学者都在寻找敏感、稳定、实用的诊断早期心肌缺血的方法和指标,从常规HE染色、特殊染色和酶组织化学、免疫组织化学、超微结构、荧光检查、离子含量改变、心包液和血液心肌损伤标志物检测、死后影像学检查等方面进行了积极的探索,所有这些方法都从不同方面、不同程度地丰富了EMI死后诊断的内容。但是上述方法或因为操作过于复杂,或实用性不强,或因为缺乏特异性、费用过高等因素的影响而限制了它们在法医病理学中的应用,实际应用价值各家说法不一,迄今仍没有敏感、实用的方法或指标能很好解决实际办案中的死因诊断问题。在众多研究方法中,免疫组织化学因其具有特异性强、敏感性高、实用性好等优点,已应用到EMI的研究和应用中来。近年来,许多学者陆续报道了如肌动蛋白(actin)、肌钙蛋白、心型脂肪酸结合蛋白(hearttypefattyacidbindingprotein,)、抗肌萎缩蛋白等蛋白分子在急性心肌缺血时从心肌细胞内脱失的现象;血浆中某些蛋白成分如补体成分、纤维连接蛋白(fibronectin,Fn)等在缺血心肌的异常分布情况;缺血心肌诱导中文摘要表达某些敏感蛋白分子,(-1alpha,)、血管内皮生长因子等。这些研究从多角度观察了急性心肌缺血时心肌细胞发生的各种变化,部分指标在EMI心脏标本进行了验证,但考虑到缺血心肌自身演变的特点和法医学实践中案例的复杂性和特殊性,单一方法和单一检测指标的应用缺乏说服力而难以有效发挥其诊断价值,而以往这些研究为多指标联合应用提供了理论依据。同时,考虑到法医检案的特殊性,如EMI发病时间、尸体保存情况、固定时间等因素的影响,需针对不同的情况进行检测指标的组合,以期达到最好的诊断效果。据此,本课题以大鼠急性心肌缺血模型和法医检案心脏标本作为研究对象,研究:①(Heidenhain染色)、(HBFP染色)对缺血心肌的染色能力,观察不同保存条件及10%福尔马林固定时间对染色的影响;②从不同角度选取检测指标:心肌结构蛋白或胞浆蛋白:actin(HHF35)、H—FABP、S100A1;黏附和进入心肌细胞内的血浆成分:、Fn;缺血心肌诱导表达的产物:聚集素蛋白(clusteri