GAS对巨噬细胞株RAW264.7功能影响.pdf

:A族溶血性链球菌(GAS)是咽部、皮肤、软组织感染的常见致病菌,也是引起儿童中毒性疾病:猩红热、毒性休克综合征等的病原体,它的危害还在于可以导致感染后的自身免疫性疾病、风湿热、风湿性心脏病、肾小球肾炎、牛皮癣以及免疫性脑病等。链球菌入侵人体后,机体最初的天然免疫也和抗其他多种病原体一样,主要是定居的巨噬细胞和招募来的嗜中性粒细胞的作用,一些研究已经描述了A族链球菌通过各种途径干扰中性粒细胞的抗微生物活性,包括释放分子干扰中性粒细胞的募集,诱导中性粒细胞死亡等,但是,A族链球菌如何逃避巨噬细胞强大的抗微生物作用国内外未有报道。,、细胞增殖,其表面分子的表达及其表达、分泌细胞因子等的影响,以进一步研究GAS的致病及其逃避免疫攻击的机制。方法:,同时细菌刺激细胞数(MOI)分别设低菌量(2:1、5:1)、中等菌量(10-1、、30:1)和高菌量(50:1、100:1),及PBS阴性和LPS阳性对照,均三复孔,作用完毕弃菌及加抗生素杀死胞外菌后,于细胞培养箱内继续培养三天,。中文摘要2以低菌量、中等菌量和高菌量GAS刺激细胞90min时,,利用TUNEL和ANNEXINV-FITC细胞凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡情况。3分别用GAS、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌以MOI为5:1时刺激巨噬细胞90min,作用完毕继续培养三天,、CD86、;、、、、,。—PCR法检测低菌量GAS束IJ激小鼠三天后,、、、、。结果:1MTT结果显示,低、,高菌量GAS对细胞增殖有抑制作用。2通过透射电子显微镜观察:低菌量细菌刺激细胞时,,功能旺盛,线粒体水肿,粗面内质网变粗糙;中剂量刺激时,细胞器发达,有髓样溶酶体结构,提示细胞吞噬消化细菌不完全;高菌量刺激细胞时,细胞出现空泡,核膜不完整等细胞坏死表象。:,细胞数减少是由于细胞坏死而不是凋亡。:,、,、。中文摘要5以低菌量GAS、大肠杆菌金和黄色葡萄球菌刺激巨噬细胞,与对照组相比,各刺激组细胞表达CD80分子均升高,且大肠杆菌升高最为显著,其次分别为金黄色葡萄球菌、GAS;大肠杆菌刺激组CD86表达水平升高,其余刺激组表达无明显变化;,但大肠杆菌与金葡菌刺激组表达升高,且有统计学意义。:,并且大肠杆菌刺激组升高明显,GAS刺激组IL。6转录反而下调。6通过Real—,与对照组比较,低菌量GAS刺激小鼠后,、,、、;、、、、。结论::能够促进其增殖,使其吞噬功能活跃,其表达促炎症因子的基因水平升高,、,相关机制、信号转导通路等仍有待研究。2低菌量GAS、大肠杆菌、、,说明在一定程度上能增强巨噬细胞的抗原递呈作用,但GAS的这种作用不明显。3高菌量GAS对细胞增殖有抑制作用,使巨噬细胞坏死而不是凋亡。中文摘要关键词:A族链球菌(GAS);巨噬细胞;;细胞因子;:us(GAS)isamajorhumanpathogenc