费氏中华根瘤菌WGF03中TsT和SiR基因的功能鉴定.pdf


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!埠‘目趣日答辩委员会主席陆光洼婴究旦广西大学学位论文原创性和使用授权声明。Y翱糖本人声明所呈交的论文,是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除已特别加以标注和致谢的地方外,论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的研究成果,也不包含本人或他人为获得广西大学或其它单位的学位而使用过的材料。与我一同工作的同事对本论文的研究工作所做的贡献均已在论文中作了明确说明。本人在导师指导下所完成的学位论文及相关的职务作品,知识产权归属广西大学。本人授权广西大学拥有学位论文的部分使用权,即:学校有权保存并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅,可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播,可以采用影印、缩印或其它复制手段保存、汇编学位论文。本学位论文属于:口保密,在年解密后适用授权。叼采保密。(请在以上相应方框内打“√")论文作者签名:郭差舻寸、指导教师签名.\中五佩舌;作者联系电话:J幻粤阽弓姐弦日期:州碑6r目岛日日期:如/;耳‘月/多日电子邮箱:秒口,九蹦以2。/。⑦,6互cpm费氏中华根瘤菌WGF03中/'sT和8iR基因的功能鉴定摘要硫是所有生物体必需的化学元素之一。它与氮相互作用,不仅能够作为生物体大分子结构组分,而且还能在新陈代谢中发挥特定作用。近年来的研究表明根瘤菌结瘤因子中的还原性末端,其硫化修饰决定了根瘤菌的宿主专一性。硫代硫酸硫转移酶由五r基因编码,通过NCBI网站的Blast比对,%的一致性,在氨基酸水平上有98%的相似性。为了鉴定这个基因的功能,我们通过pKl8mobsacB同源双交换的方式,构建TsT基因的缺失突变体TsTI。7kT基因缺失突变后,在以硫代硫酸钠为唯一硫源的MM培养基中,突变菌株TsTI不能生长,但是可以利用硫酸盐、亚硫酸盐、半胱氨酸和甲硫氨酸为唯一的硫源正常生长。植株实验发现,乃丁基因突变后,根瘤菌的结瘤时间推迟l天,竞争结瘤的能力下降,单株的结瘤数量也有所下降,同时在瘤重、。亚硫酸还原酶是硫代谢途径中的一个酶,催化亚硫酸盐还原为硫化物。该酶由SiR基因编码,通过NCBI网站的Blast比对,%的一致性,在氨基酸水平上有98%的相似性。为了鉴定这个基因的功能,我们通过pKl8mobsacB同源双交换的方式,构建SiR基因的缺失突变体SiRI。SiR基因缺失突变后,在以硫酸钠、亚硫酸钠为唯一硫源的MM培养基中,突变菌株SiRI不能生长,而野生型菌株WGF03和互补菌株CSIRI生长正常,但是突变菌株SiRI可以利用硫代硫酸盐、半胱氨酸和甲硫氨酸为唯一的硫源的正常生长。植株实验也证实,SiR基因缺失突变后,根瘤菌的结瘤时间推迟2天,竞争结瘤的能力下降,单株的结瘤数量也有所下降,同时在瘤重、。关键词:sTANDSiRINSinorhizobiumfrediiWGF03ABSTRACTSulfurisoneofbiologicalchemicalelement,,,researchhasshownthatthemodificatontothereductedendofNodfactor,%identitiesatnucleotideleveland98%,,wereunab

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  • 时间2016-11-06