寡克隆肝癌浸润淋巴细胞的体内抗肿瘤活性及机制研究.pdf

'—◆军医天罢硕士学位论文寡克隆肝癌浸润淋巴细胞的体内抗肿瘤活性及机制研究Studyoftheanti--tumoractivityanditsmechanismsofoligoclonaltumor-infiltratinglymphocytesinH22tumor-bearingmice本课题受国家自然科学基金资助(81101716)20101364指导老师:旌压堡教援殷正主教援韭丛!峰主渔医!!巫学科专业:窆E抖堂(压坦丕痘)学位类型:!直废医堂童些堂僮培养单位:箍三至医太堂丕友压厘窆E型医院二零一三年四月一苓一二年四月上海第二军医大学东方肝胆外科医院独创性声明UIIIY2339863本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作。除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。本人承担本声明的法律责任。学位论文作者签名:铱亲勘日期:M,多年厂月、)日学位论文版权使用授权声明本人完全了解第二军医大学有关保留、使用学位论文的规定,第二军医大学有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权第二军医大学可以将学位论文全文或部分内容编入《中国学位论文全文数据库》、《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》等数据库进行检索。可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名:涨凉勃导师签名:日期:弘f许y月弓)日日期:即f、年厂月Z目录中文摘要??????????????????????????.1。英文摘要?????????????????????????...?????????????????????????.?????????????????????????????????..?????????????????????????????????.-ll一一、实验材料与主要器材??????????????????.13.(一)实验材料?????????????????????.、细胞株????????????????????、动物????????????????????????????...、主要生物试剂、化学药品和耗材?????????、主要溶液的配制?????.:???????????..14.(二)主要实验器材??????????????????..、实验方法???????????????????????..16.(一)细胞培养及传代?????????????????..、细胞复苏????????????????????.、细胞冻存???????????????????...、细胞传代????????????????????.16—4、细胞计数????????????????????.17.(--)建立H22肝癌荷瘤小鼠模型????????????.17.(三)TIL分离、培养和鉴定???????????????.、寡克隆肝癌TIL分离和培养???????????..、常规肝癌TIL分离和培养????????????..18.(四)流式细胞术检测CD8+T细胞的比例?????????.18.(五)检Nd,鼠肝癌TIL体外杀伤活性??????????.18.(六)建立过继免疫治疗H22肝癌荷瘤小鼠模型??????.19.(七)过继免疫治疗H22肝癌荷瘤小鼠??????????.19.(八)标本收集????????????????????..19.(九)ELISA法检测血清中细胞因子含量?????????.20.(十)H&E染色检测肿瘤组织中淋巴细胞浸润???????.21-(十一)??.23.(十--)统计学分析??????????????????..、实验结果???????????????????????..25.(一)建立H22肝癌荷瘤小鼠模型????????????.25.(二)寡克隆肝癌TIL的生长及鉴定???????????.25.(三)肝癌TIL对小鼠H22肝癌细胞的体外杀伤活性????.27.(四)肝癌TIL对荷瘤小鼠的过继免疫治疗效果??????.、???????、组织病理改变及淋巴细胞浸润??????????、治疗后血清细胞因子表达水平变化????????、TIL对小鼠肝癌移植瘤的抑制作用????????????????????????