茯苓菌种保藏效果的比较.pdf

dible fungi2016(5)茯苓是最早纳入《中国药典》的药用食用菌之一,具有健胃、祛湿、健脾、安神、增强免疫力、抗癌等功效,据统计目前中药配方中茯苓配伍率达80%,近年来茯苓已广泛应用于医药、保健品和食品领域。我国湖北、湖南、安徽、云南和福建等地都有较大茯苓种植规模,产量也不断增加。茯苓优良菌种是栽培生产的基础和关键,但目前国内推广的茯苓菌种来源单一,而且在长期使用过程中退化严重,直接影响其产量和质量,因此菌种必须进行合理的保藏。目前食用菌的菌种保藏常用斜面法、甘油法、木屑管法、矿物油法、冷冻干燥法、液氮保藏法等。每种菌种保藏方法都有其优点和缺点,笔者进行茯苓菌种的斜面、木屑、液体石蜡保藏效果比较,旨在找出适合茯苓菌种保藏、易操作的方法,为茯苓菌种的生产和栽培提供基础保障。,由华中农业大学菌种中心提供;茯苓8号,由湖南靖州茯苓菌核分离获得,湖南省微生物研究院菌种保藏中心保藏。:马铃薯200g煮汁,葡萄糖20g,蛋白胨2g,磷酸二氢钾2g,硫酸镁1g,琼脂18g,加水1000mL,自然pH。培养基注入玻璃试管,试管口加棉塞,121℃灭菌20min,60℃烘干棉塞后摆斜面,长度为试管长1/3。接种茯苓菌种,26℃培养,待菌丝长满斜面,塞子换成已灭菌的橡皮塞,固体石蜡封口,再用塑料薄膜包封,4℃保藏。:木屑1000g,麸皮200g,蔗糖5g,,。含水量60%。培养基装入玻璃试管,容量为管长的2/3,装入管中培养基松紧适中,擦净管口塞紧棉塞,用牛皮纸包扎管口后高压灭菌,121℃灭菌60min,60℃烘干棉塞。冷却后接种茯苓菌种,26℃培养,待菌丝长至1/2管,塞子换成已灭菌的橡皮塞,固体石蜡封口,再用塑料薄膜包封,4℃保藏。,加棉塞,瓶口包牛皮纸,121℃高压灭菌60min,取出置140℃烘箱中3h除去液体石蜡的水分。将上述液体石蜡冷却至室温,加入培养好的茯苓斜面菌种试管,液面高出培养基1cm,塞子换成已灭菌的橡皮塞,用石蜡封口,再用塑料薄膜包封,直立于试管架4℃保藏。,在保藏5年期间每年进行试验,菌种接至斜面,26℃培养,观察菌丝是否萌发,4次重复。,在保藏3年期间每年进行试验,4次重复。菌种转接至9cm玻璃平皿,26℃培养,接种后8d长满培养皿,测定每个处理的菌丝直径,观察菌丝长势,计算菌丝日均生长速度。日均生长速度(cm·d)=菌丝直径/培养天数。、木屑管和液体石蜡保藏4年的菌种在湖南靖州开展人工栽培试验,采用松树兜法栽培法。,茯苓1号和茯苓8号的斜面、木屑管和液体石蜡保藏的菌种接种新斜面后菌丝能正常萌发(表1);保藏2年,斜面保藏菌种接种新斜面后不能萌发,木屑管和液体石蜡保藏的菌种均萌发,表明斜面保藏茯苓菌种的期限为1-2年之间;保藏3年,木屑管和液体石蜡保藏的菌种均萌发。茯苓1号菌种保藏第4年,木屑管