动物生理学实验设计.doc

动物实验设计姓名: 学号: 班级: 指导老师: 二 O 一二年十二月乙酰胆碱对鲫鱼离体肠平滑肌的作用一、前言在生理学实验中,通过学生自主设计实验项目,收集资料完成实验并以论文格式完成实验报告,有利于学生及时掌握生理学实验的基本内容,旨在培养和提高学生观察、分析、综合、独立思考和解决问题的思维能力。促胃肠动力药包括很多种类, 这类药物有着不同受体类型和化学结构以及作用机制, 对从食管到结肠的胃肠道的不同部位有着不同程度的促动力作用. 这类药物对胃肠道作用机制的研究包括:胆碱能机制、肾上腺能机制、抗多巴***和抗胆碱脂酶机制、神经体液机制等。本实验重在探索通过离体器官实验,建立方法研究药物对 M胆碱受体的激动作用和竞争性拮抗作用。M胆碱受体激活剂乙酰胆碱能剂量依赖性地激动肠管平滑肌上的 M胆碱胆碱受体,产生平滑肌收缩效应,M胆碱受体抑制剂阿托品可竞争性拮抗乙酰胆碱对 M胆碱受体的激动作用。二、研究内容 1、通过向离体小肠滴加不同浓度乙酰胆碱和阿托品观察小肠平滑肌的收缩曲线变化 2、通过生物信号采集系统对鲫鱼收缩曲线进行记录三、研究对象鲫鱼,鲤形目、鲤科、鲫属,是一种主要以植物为食的杂食性鱼,喜群集而行, 择食而居。鲫鱼分布广泛,全国各地水域常年均有生产,以 2~4 月份和 8~12 月份的鲫鱼最肥美,为我国重要食用鱼类之一。四、实验药品及设备 1、试剂和药品:乙酰胆碱(mol/L ):1:32000 、1:16000 、1:8000 、1:4000 、1:2000 、 1:1000 阿托品( mol/L ): 3*10 -7 Jaeger :***化钠 、***化钾 、***化钙 、碳酸氢钠 、 、葡萄糖 、蒸馏水加至 1000 ml、 2. 装置和器材:恒温平滑肌浴槽、计算机生物信号采集系统、万能支架、加液器、纱布、张力换能器、鱼类手术器械一套。五、实验方法与步骤 ,立即剖开腹腔, 自幽门下 5cm 剪取空肠和回肠上段,迅速置于 Jaeger 液中。小心剪去肠系膜,用吸管吸取 Jaeger 液缓慢冲洗肠内容物; 将空肠段分割成 2cm的小段备用, 用棉线结扎肠断两端,作为固定肠肌之用。 ,另一端连接于肌力换能器的应变片上并与生物信号采集系统的刺激器输出相连,浴池内放 20ml Jaeger 液。适当调节换能器的高度,使其与标本间的松紧度合适。将肠段完全浸浴在调好温度的浴槽中,并调整好 Jaeger 充气量(小气泡接连不断)。 ,固定 L管并调节扎线与张力传感器,使肠段运动自如又能牵动传感器(注意:扎线不可贴壁或过紧过松)。调节增益与扫描速度, 使肠段的运动曲线清晰地显示在显示器上并记录肠段活动曲线。 (1 )记录对照肠段运动曲线后,加入 2滴乙酰胆碱(1:32000 ) ,观察并记录曲线变化,记录完毕后,用干净的 Jaeger 冲洗至收缩曲线恢复正常。以后按照此步骤,依次加入 2滴浓度分别为 1:16000: 、1:8000 、1:4000 、1:2000 、1:100 0 的乙酰胆碱,分别记录下对照与变化曲线,观察不同浓度乙酰胆碱对