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生化实验二蛋白质测定.ppt

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实验二人血清蛋白质含量测定蛋白质测定的主要方法?根据蛋白质元素组成——凯氏定氮法; ?根据蛋白质组成特点建立的比色法——双缩脲法, lowry 改良法,考马斯亮蓝染色法, BCA 法; ?根据蛋白质的吸收特性建立的紫外分光光度法; 蛋白质的紫外吸收。它们具有吸收紫外光的性质。 280nm 波长处,且在此波长内吸收峰的光密度值与其浓度成正比。 Tyr Trp双缩脲法测定蛋白质实验原理——双缩脲反应 180 oC 双缩脲在碱性条件下可与铜结合成紫红色复合物 Cu 2+ OH -?蛋白质具有双缩脲结构,在碱性条件下也能与铜结合成紫红色复合物在一定的范围内,颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比—— 1-10mg ,因此通过比色法可以测定蛋白质含量。标准曲线的作用和绘制根据 Lambert-Beer 定律, A与C成正比配制一系列标准液 C 1、C 2、C 3??, 在? max下,测相应的 A 1、 A 2、A 3……。 A xC x

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