基因工程考试题库(便携版)资料.pdf

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基因工程考试题库（便携版） 及其分子量
5. 限制性片段长度多态性（RFLP）：当 DNA 序列的差异发生在限制 大小。
性内切酶的识别位点时，或当 DNA 片段的插入、缺失或重复导致基 24、菌落原位杂交：是将菌落或噬菌斑转到固相膜上，原位裂解细胞
因组 DNA 经限制性内切酶酶解后，其片段长度的改变可以经过凝胶 后使核酸固定在膜上，然后与探针杂交。用标记的核酸探针，经放射
电泳区分，出现的这种 DNA 多态性称为限制性片段长度多态性。 自显影或非放射检测体系，在组织细胞间期染色体上对核酸进行定位
6. 星号活性：限制性内切核酸酶识别和切割特异性位点是在特定的 和相对定量研究的一种手段。
条件下测定的。当条件改变时，许多酶的识别位点会改变，导致识别 26、真核细胞原位杂交：是一项组织化学与分子杂交相结合的技术，
与切割序列的非特异性，这种现象称为星号活性。（“非最适的”反应 使探针与固定在载玻片上的细胞组织切片内的变性染色体杂交。
条件例如高浓度的核酸内切限制酶、高浓度的甘油、低离子强度、用 27、荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization，FISH）：对寡
Mn2+取代 Mg2+以及高 pH 值等。)克服星号活性的方法：维持反应体 核苷酸探针做特殊的修饰和标记，后用原位杂交方法与靶染色体或
系适当的离子强度、较低的温度或酶浓度，尽可能缩短反应时间或 DNA 上特定的序列结合，再通过与荧光素分子相偶联的单克隆抗体
DNA 样品的重新处理等。 （单个细胞增殖形成的细胞群所产生的抗体）来确定该 DNA 序列在
7. 载体(vector): 在基因操作中携带外源基因进入受体细胞的工具。 染色体上的位置。
克隆载体：主要用于扩增或保存 DNA 片段，是最简单的载体。主要 28、凝胶阻滞试验：（gel retardation assay）：又叫 DNA 迁移率变
有：质粒载体、噬菌体载体、黏粒载体、人工染色体（YAC和 BAC）。动试验（electrophoretic mobility shift assay，EMSA），是用于
YAC（酵母人工染色体）：是利用酿酒酵母的染色体的复制元件构建的 体外研究 DNA 与蛋白质相互作用的一种特殊的凝胶电泳技术。
载体，其工作环境也是在酿酒酵母中。 26. 盒式诱变：就是用一段人工合成具有突变序列的 DNA 片段，取
BAC（细菌人工染色体）：是基于大肠杆菌（）的 F 质粒构建的 代野生型基因中的相应序列。这就好象用各种不同的盒式磁带插入收
高通量低拷贝的质粒载体。 录机中一样，故而称合成的片段为“盒”，这种诱变方式为盒式诱变。
表达载体是可携带外源基因进入宿主细胞进行复制并进行转录、翻译 27. 定点诱变（ 寡核苷 酸介导；重 叠延伸 PCR 、大引物 PCR ）：
的载体。 （site-directed mutagenesis）是使已克隆基因或 DNA