黄酮标准曲线绘制的实验报告.doc

黄***标准曲线绘制的实验报告
黄***标准曲线绘制的实验报告
***的测定
实验仪器
电子天平AR2140;
紫外可见分光光度计UV2754;
型数控超声波清洗器KQ3200DB;
超级恒温槽;
Rotav乙醇定容至刻度线则稀释5倍。取稀释后溶液1ml四份,分别置于10mL比色管中，加入2 ml福林试剂，充分摇匀，加入0．75ml ％碳酸钠溶液．混匀，以蒸馏水稀释至刻度。振荡一下，静置2h。同时制作空白管。为消除供试品溶液本身颜色的干扰，同时制作不加显色剂的对照管。于
765 nm波长处测定吸光度值。
总酚酸含量计算：
多酚含量（mg/100g）=
DPPH·的能力的测定
、药品及试剂
实验仪器
ALZO4型电子分析天平:上海梅特勒一托利多仪器有限公司;
DELA犯O型pH计:上海梅特勒一托利多仪器有限公司;
723可见分光光度计:上海菩华科技仪器有限公司;
DK一512型电热恒温水浴锅:上海森信实验仪器有限公司;
容量瓶(250mL，10OmL，25mL)、比色管(10mL);
烧杯、移液管、吸耳球。

DPPH·（2，2-diphenyl-1-picrylhydrazyl，二苯代苦味肼基自由基）；
Vc（Ascrobic acid，维生素 C，抗坏血酸）为分析纯；
无水乙醇，蒸馏水

，放入冰箱4℃进行冷藏，以备用。

，置于50mL的容量瓶中定容至刻度线及可以得到2mmol/L的母液，分别量1、2、3、4、5、6ml至10ml的比色管中用无水乙醇定容至刻度线，、、、、1mmol/L、。，反应30min,在517nm测出吸光值(Thoo&Ho,2010)，用无水乙醇代替待测液作为对照，用无水乙醇作空白，重复三组。
清除率=[(Ac-Ai)/Ac]×100%
式中，Ac： mL 无水乙醇加 DPPH 溶液的吸光度；
Ai： mL 待测液加 溶液的吸光度。


序号
C（mmol/L）
吸光度
清除率/%
0
0
0
1



2



3



4



5
1


6



表3-1：VC标准曲线测定数据
以吸光度A 为纵坐标,浓度c为横坐标,绘制标准曲线。用最小二乘法进行线性拟合,得c与A 的线性回归方程以及相关系数R2。
图3-1：VC含量与吸光度的关系
图3-1：VC含量与清除率的关系

取提液4ml至10ml的比色管中用60%。,分别置于10mL 试管中，,摇匀，反应30min后，分别在517nm处测定其吸光度。代入标准曲线回归方程可得浓度数据（以Vc为参比）,三次结果取平均值。经换算后得样品自由基清除率。
4. 清除ABTS+自由基能力的测定
+自由基的配制
，用无水乙醇定容，摇匀，浓度7mmol/L；7mmol/LABTS+.，在室温、避光黑暗的条件下静置过夜反应12~16h，形成 ABTS+ 自由基储备液。该储备液在室温，避光的条件下稳定。用前用无水乙醇稀释成工作液，（±），再装入棕色试剂瓶中，放入冰箱4℃进行冷藏，以备用。


，置于50mL的容量瓶中用无水乙醇定容至刻度线及可以得到1mmol/L的母液，分别量1、2、3、4、5、6、7、8m
l至10ml的比色管中