最新神经干细胞在人胎脑及缺血缺氧性脑病中变化规律研究-儿科学专业毕业论文.docx

神经干细胞在人胎脑及缺血缺氧性脑病中变化规律研究-儿科学专业毕业论文
中英文名词缩写与对照
英文缩写 英文全称 中文全称 NSC neural s经元细胞、星形胶质细胞和少突胶质细 胞的特异性抗原。各胎龄组、各部位分别培养的NSCs在细胞形态、增 殖和多分化潜能方面无明显差异。
结论：胎龄L6～36w人胎脑海马、室下区、纹状体、额叶、颢叶、 顶叶等部位均存在NSCs。冻存细胞和水囊引产后48h内别离的原代细胞 均能培养出NSCs，其原代NSCs与死亡时间呈负相关；bFGF和EGF是 NSCs存活和增殖的关键生长因子。Nestin和CDl33是人胎脑NSCs的特 征性标记物，CD34可能是人胎脑晚期NSCs的特征性标记物。不同胎龄 同一部位人胎脑NSCs在分布部位、形态、生长方式以及数量等方面存 在差异，同一胎龄不同部位人胎脑NSCs在分布部位、形态、生长方式 以及数量等方面同样存在差异。人胎脑室下区及海马齿状回是NSCs的 发源地，但人胎脑可能存在室下区及海马齿状回以外的NSCs生发中心。 人胎脑NSCs仍然是移植的重要材料来源。人胎脑在体NSCs的形态多样 性与体外培养NSCs的形态单一性不一致的现象提示，在体调控自身 NSCs的增殖和分化可能是治疗疾病另一条更有前景的道路。
关键词：人；胎脑；海马；室下区；纹状体；额叶；颞叶：顶叶； 枕叶；神经巢蛋白；CD34：CDl33；原位杂交；免疫组织化学；免疫荧 光染色：细胞别离；细胞培养
第二局部神经千细胞在缺血缺氧性脑病中变化规律初探 目的：建立新生鼠缺血缺氧性脑病动物模型，说明HIE病程中NSCs
．3．
的变化特点，为临床有效地治疗HIE及适时地应用NSCs干预治疗HIE 提供理论及实验依据。
方法：231只新生7日SD乳鼠随机分为正常对照组、单纯缺氧组及 缺血缺氧组。每组77只。每组又根据处死时间点随机分成3h， 6h，ld，3d，7d，14d，21d等7个小组。每小组11只，其中，10只用于组织学 研究，1只用于细胞培养。结扎新生7天SD大鼠左颈总动脉，置于8％ 氧浓度的低氧环境中2．5h。单纯缺氧组缺氧2．5h，缺血缺氧组结扎血管 后缺氧2．5h。采用HE染色、免疫组织化学染色以及光镜技术分别对3 组SD大鼠脑组织中的NSCs进行检测，并采用包含bFGF及EGF的无 血清培养基和细胞培养技术，分别对3组SD大鼠脑组织中NSCs进行分 离，并在体外进行培养、传代、分化，同时应用免疫细胞化学对培养的 NSCs及其分化的细胞进行鉴定。
结果：缺血缺氧后3h出现轻度脑损伤，1d病变最严重，3d、7d胶质 细胞增生，14d、21d出现脑萎缩。3组SD大鼠脑组织存在NSCs，且细胞 呈单一的圆形，突起不超过1个，阳性NSCs呈明显的区域性分布，神 经球集落样存在的NSCs较多。在3h、6h、14d等时间点，3组之间比拟 NSCs无差异；在1d、3d、7d时间点，缺血缺氧组与单纯缺氧组比拟NSCs 差异非常显著；在21d时间点，缺血缺氧组与单纯缺氧组NSCs差异显 著：在3d时间点，缺血缺氧组与正常对照组比拟NSCs差异非常显著； 在7d、2ld时间点，单纯缺氧组与正常对照组之间差异非常显著。在21d 时间点，单纯缺氧组与正常对照组之间差异非常显著。以3d时间点为转 折点，3组内NSCs在3d时间点之前呈上升趋势，在3d时间点之后呈下 降趋势。各时间点SD鼠脑组织均能在无血清培养基中培养出NSCs，并 能传代及诱导分化。
结论：成功建立了缺血缺氧性脑病动物模型；3组生后7d至28d的 SD大鼠均能在体外培养出NSCs；HIE发病中其病变脑组织存在NSCs， 早期NSCs增殖；随着病情的演变，NSCs开始减少，最后导致病变区的 NSCs相继死亡；低氧有利于NSCs的增殖；本研究将为临床合理治疗 HIE拓宽视野；采用NSCs干预治疗有希望成为临床治疗HIE的重要途 径。
．4。
关键词：新生鼠；脑；缺血缺氧性脑病；动物模型；神经干细胞卉申经巢 蛋白；免疫组织化学；细胞别离：细胞培养
A study OH changing laws of neural stem cells in human fetal
brain and hypoxic ischemic encephalopathy Department of Pediatr