实验三药敏.ppt

实验三药敏
汇报人:
结果观察：
1、结果解释：用毫米尺量取抑菌圈直径，参照书上的标准判读结果。按敏感（S）、中介（I）、耐药（R）报告。
例如：抗菌药物丁***卡那霉素（AMK），每张纸片含药量30微克，抑菌圈≤14mm为耐药
实验三药敏
汇报人:
结果观察：
1、结果解释：用毫米尺量取抑菌圈直径，参照书上的标准判读结果。按敏感（S）、中介（I）、耐药（R）报告。
例如：抗菌药物丁***卡那霉素（AMK），每张纸片含药量30微克，抑菌圈≤14mm为耐药，15-16mm为中介，≥17mm为敏感。
2、质量控制：标准菌株的抑菌圈应落在书上的预期范围内，如果超出该范围，应为失控，而不发报告，应及时查找原因，予以纠正。
例如：抗菌药物丁***卡那霉素（AMK），每张纸片含药量30微克，金黄色葡萄球菌ATCC标准株的抑菌圈应在20-26mm之间。
思考题：
影响因素？
1、培养基的质量：双层抑菌圈的出现？
2、纸片质量
3、接种细菌的菌量
4、孵育的温度和时间
5、操作因素
稀释法
微量稀释法
常量稀释法（试管稀释法）
常量稀释法（试管稀释法）
1、实验目的：
用于测量某种药物对测试菌的最小抑菌浓度（MIC）
2、实验原理：
将抗菌药物混合于肉汤中作一系列的稀释，再加入定量的测试菌，经一定时间和温度培养后，无细菌生长的最低药物浓度即为该药对此菌的MIC。
定量的测试菌的制备
1、将金黄色葡萄球菌ATCC25923和金黄色葡萄球菌临床种的6小时肉汤培养物，（×108CFU/ml)；或挑新鲜培养的单个菌落，在无菌生理盐水中研磨，。
2、将调好浊度的菌液用无菌肉汤稀释10倍，即可使用。
步骤和方法
将抗菌药物用肉汤稀释成不同浓度，加入定量测试菌。
编号 1 2 3 4 5 6 7 8 9（对照）
无菌肉汤管 1 1 1 1 1 1 1 1
（ml）
青霉素 1 1 1 1 1 1 1 弃去
(80单位）

（ml) 37℃培养16-18小时
结果观察:
完全抑制细菌生长的最低药物浓度即为该抗菌药对此菌的MIC。
此次实验即为青霉素对金黄色葡萄球菌ATCC株和临床株的MIC。
结果举例：
编号 1 2 3 4 5 6 7 8 9
无菌肉汤管 1 1 1 1 1 1 1 1
（ml）
青霉素 1 1 1 1 1 1 1 弃去
(80单位）
金葡菌
结果
细菌生长 - - - - - + + + +
青霉素浓度 8 4 2 1 对照--
结果判断:抑制肉眼可见生长的最低药物浓度为该药对检测菌的MIC
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YOU