1. REPLICATION (DNA SYNTHESIS) 2. TRANSCRIPTION (RNA SYNTHESIS) 3. TRANSLATI功能。 ——全功能酶(识别、解旋、螺旋、聚合延伸、校正等功能) 第十六页,共一百三十八页。 2. 转录调控序列 启动子promoter 操纵基因 operator 启动子:RNA聚合酶全酶以很高的亲合性结合在基因调控区的特定位点。 原核生物启动子序列-10区和-35区 ——必需序列 第十七页,共一百三十八页。 启动子结构 第十八页,共一百三十八页。 Promoter structure in prokaryotes 5’ PuPuPuPuPuPuPuPu AUG Promoter +1 +20 -7 -12 -31 -36 5’ mRNA mRNA TTGACA AACTGT -30 region TATAAT ATATTA -10 region 84 79 53 45% 82 T T G 64 A C A 79 T 44 T 96% T 95 A 59 A 51 A consensus sequences -30 -10 transcription start site Pribnow box +1 [ ] 第十九页,共一百三十八页。 -10区:在-6~-13bp之间,共同序列为 TATAAT,又称pribnow框,酶在 此处与DNA结合成稳定的复合物,在 转录方向上解开双链形成开放型起始 结构。 -35区:共同序列为TTGACA,是RNA聚合酶 起始识别区,这一识别过程与因子有 关。 第二十页,共一百三十八页。 -10区和-35区相距约20bp,大致是双螺旋绕两周的长度,两个结合区在分子的同一侧面,能感觉到沟底碱基的特异形态。 第二十一页,共一百三十八页。 上节回顾: 1. DNA损伤修复
2. 基因转录基本概念, 特点
3. 原核生物RNA聚合酶 第二十二页,共一百三十八页。
起始: RNA聚合酶全酶识别-35区,再识别-10区, 形成封闭型起始复合物 转录起始位点处DNA解链,形成开放型起始复合物 第一个核苷酸结合上去(多数是G/A、C) 合成7-8个核苷酸,起始过程完成 第二十三页,共一百三十八页。 RNA polymerase holoenzyme (+ s factor) closed promoter complex (moderately stable) the sigma subunit binds to the -10 region once initiation takes place, RNA polymerase does not need very high affinity for the promoter sigma factor dissociates from the core polymerase after a few elongation reactions elongation takes place with the core RNA polymerase open promoter complex (highly stable) the holoenzyme has very high affinity for promoter regions because of sigma factor s sigma can re-bind other core enzymes The sigma cycle s s 第二十四页,共一百三十八页。 Transcription RNA polymerase closed promoter complex open promoter complex initiation elongation terminatio