参七虫草胶囊对慢阻肺大鼠模型γgcs活性及表达的影响.docx

引言
境污染、药物治疗[支气管舒张剂〔β2冲动剂、抗胆碱药及***黄嘌呤类〕，抗菌
药，糖皮质激素，祛痰药，抗氧化剂，免疫调节剂，疫苗，中医药等]、外科治疗、
氧疗、康复治疗。住院期间加用机械通气疗法[6]。
de，LPS)，第2-13天、15-60
〕[13][14]。
气管内滴入脂多糖法：上午九点大鼠空腹状态下，以20﹪的乌拉坦〔剂量为
1ml/100g〕腹腔注射麻醉大鼠后，将其头部后仰，颈背部用纱布垫垫起并固定于
鼠板上。修剪颈前部皮肤，碘酒酒精消毒。5号静脉注射套管针与皮肤成45度角
斜行穿刺入气管，待有突空感并回抽出空气后，用1ml注射器抽取溶于生理盐水
〔浓度为1mg/1ml〕，注入药液。随后将鼠板竖起，左右旋转使LPS
药液尽可能均匀地分布于两肺。穿刺点再次碘酒酒精消毒。
熏香烟法：每日上午九时将大鼠置入自制的有机玻璃熏烟箱内〔大小为80cm
×60cm×50cm，〕，于箱内点燃10支香烟〔香梅
牌，烤烟型，焦油量14mg，烟气烟碱量11mg，由安徽中烟公司出产〕，30分钟后
将大鼠取出。每日一次。
给药方法
空白对照组：在模型组大鼠气管内滴入脂多糖的同时，按同样的方法气管内
注入生理盐水，其余时间置于无烟环境中正常饲养至实验结束。
慢阻肺模型组：生理盐水灌胃4周，4周后复制慢阻肺模型〔造模第1、14天
气管内滴入LPS，第2-13天、15-〕。造模期间继续生理盐
水灌胃。
参七虫草胶囊高剂量组：参七虫草胶囊〔／kg／d，相当于***用量的l0
倍〕灌胃4周，4周后复制慢阻肺模型〔造模第1、14天气管内滴入LPS，第2-13
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参七虫草胶囊对慢阻肺大鼠模型γ-GCS活性及表达的影响
天、15-〕。造模期间继续药物灌胃。
参七虫草胶囊低剂量组：参七虫草胶囊〔／kg／d，相当于***用量的5
倍〕灌胃4周，4周后复制慢阻肺模型〔造模第1、14天气管内滴入LPS，第2-13
天、15-〕。造模期间继续药物灌胃。
金水宝胶囊组：金水宝胶囊(／kg／d，相当于***用量的10倍)灌胃4
周，4周后复制慢阻肺模型〔造模第1、14天气管内滴入LPS，第2-13天、15-60
〕。造模期间继续药物灌胃。
取材、组织固定方法
大鼠处死后翻开胸腔，将右主支气管连同右肺剪下，右肺下叶置入含
1/1000DEPC的4℅多聚甲醛溶液固定〔用于原位杂交〕，余肺组织置入10℅的甲醛
溶液中固定。
肺功能测定方法
小动物肺功能仪由动物体描箱、信号放大系统、USB接口高速数据采集卡、
AniRes2003软件分析系统、计算机、动物呼吸机、负压系统组成。
％的水合***醛〔10ml/kg体重〕腹腔麻醉后，仰卧位置于小动物肺功能仪的体描箱
内，行颈部正中气管切开，插入气管插管，气管插管一端与动物呼吸机相连。先
描记一端平静呼吸，然后测用力肺活量〔FVC〕。FVC的测量自动进行，先由动物呼
吸机向实验动物输入所设定的FVC气量〔通常为潮气量的4-6倍〕来模拟用力吸
气，后由负压系统〔-25cmH2o〕抽气来模拟用力呼气的过程。动物呼吸时，胸廓的
扩张与收缩改变了体描箱内的气体容积，容积的变化引起压力的改变。通过测量
体描箱内气体压力的变化，间接获取肺容积的变化，经计算机处理后得到所需肺
功能的各项指标。

形态学观察：
肺组织形态大体观察:肉眼观察大鼠肺脏的大小、形态、色泽、质地、弹性等
情况。
肺组织形态光镜观察:／L中***尔马林灌注
固定72小时，按规定部位各取组织7块，常规制片，HE染色。在光镜下观察肺组
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实验一参七虫草胶囊对慢阻肺大鼠模型肺组织形态学及肺功能的影响
织形态学的变化并摄片。
肺组织形态电镜观察:取气管组织，经25ml／L戊二醛固定，逐级乙醇脱水，
JSM—T300型扫描电镜观察并摄片；取肺组织3小块，25ml／L戊二醛固定，逐
级乙醇脱水，Epon8l2包埋，超薄切片用ZeissEM10C型透射电镜观察并摄片。
肺功能的观察
最大通气量〔MVV〕、用力肺