实验一培养基的制备消毒与灭菌及超净工作台的使用详解演示文稿.ppt

实验一培养基的制备消毒与灭菌及超净工作台的使用详解演示文稿
第一页，共二十一页。
优选实验一培养基的制备消毒与灭菌及超净工作台的使用
第二页，共二十一页。
课堂纪律
严格遵守实验室规章制度
严肃课堂实验一培养基的制备消毒与灭菌及超净工作台的使用详解演示文稿
第一页，共二十一页。
优选实验一培养基的制备消毒与灭菌及超净工作台的使用
第二页，共二十一页。
课堂纪律
严格遵守实验室规章制度
严肃课堂纪律
不允许无故旷课、早退（1次）
迟到（3次）
不能做与实验无关的事
第三页，共二十一页。
实验室安全和卫生
安全
实验室严禁吸烟。
注意用水、防电和防火
正确使用化学试剂和仪器
卫生
每次实验需留下6位同学值日，协助保持实验室清洁
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1、了解培养基的概念、种类和用途，明确培养基的配制原理。
2、学****掌握培养基配制的一般方法和步骤。
3、掌握高压蒸汽灭菌的原理和方法步骤。
实验目的
一、培养基的配制
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培养基(culture medium)是指人工配制的、适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质。
自然界中微生物种类繁多，营养类型多样，加之实验和研究目的不同，所以培养基的种类很多，不同种类的培养基一般都应含有微生物生长所需的碳源、氮源、能源、无机盐、生长因子和水六大营养要素，且各成分比例应合适。
为了满足微生物生长繁殖或积累代谢产物的要求，还必须控制培养基合适的pH。
实验原理
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常用凝固剂是琼脂，%-2%；%-%。
实验原理
常用培养基：
牛肉膏蛋白胨培养基广泛用于细菌的培养；高氏一号培养基用于培养放线菌；麦芽汁培养基和豆芽汁培养基通常用于酵母菌的培养；马铃薯葡萄糖培养基被广泛用于培养霉菌。
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实验分组安排
5-6人一组，配制牛肉膏蛋白胨固体培养基
每组配 500 mL牛肉膏蛋白胨固体培养基斜面1支（每人），其余分装在两个500 mL三角瓶。
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第九页，共二十一页。
第十页，共二十一页。
第十一页，共二十一页。
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包扎：
◇加塞后，试管通常每7支一起，包上一层牛皮纸或两层报纸，用线绳扎紧。三角瓶加塞后也用牛皮纸包扎。
◇以活结形式扎紧，以便使用时容易解开。
◇用记号笔注明培养基名称、配制日期、配制人或实验组。
灭菌时包牛皮纸、报纸
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灭菌：
◇ 培养基灭菌一般采用压力蒸汽灭菌
◇ kg/cm2, 121℃灭菌20-30分钟；含糖量高的培养基， kg/cm2,115℃灭菌30分钟。
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二、消毒与灭菌
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第十六页，共二十一页。
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紫外线灭菌----
紫外线波长在200-300 nm,具有杀菌作用，其中以265-266 nm杀菌力最强。
无菌室或无菌接种箱空气可用紫外线灯照射灭菌。
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干热灭菌
电烤箱
1、干热灭菌
2、压力蒸汽灭菌
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干热灭菌
1、装入待灭菌物品
2、升温：接通电源，加热升温至160-170℃。
3、恒温：保持160-170℃ 2小时。
4、降温：切断电源，自然降温。
5、开箱取物：待烤箱温度降到70℃以下以后，方可打开箱门，取出物品。箱内温度高于70℃，切勿自行打开箱门，以免玻璃器皿炸裂。
第二十页，共二十一页。
第二十一页，共二十一页。