RNA提取方法及原理.ppt

RNA 提取方法及原理 John Evaluation only. Evaluation only. Created with Client Profile . Created with Client Profile . Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 1、研究背景 RNA 研究的重要性 DNA , RNA 和蛋白质是三种重要的生物大分子,是生命现象的分子基础。 DNA 的遗传信息决定生命的主要性状,而 mRNA 在信息传递中起很重要的作用。其它两大类 RNA , rRNA 和 tRNA ,同样在蛋白质的生物合成中发挥不可替代的重要功能。因此 mRNA 、 rRNA 、 tRNA 在遗传信息由 DNA 传递到表现生命性状的蛋白质的过程中举足轻重。 Evaluation only. Evaluation only. Created with Client Profile . Created with Client Profile . Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. RNA 分布不同丰度高丰度中丰度低丰度高丰度中丰度低丰度组织名称肝脏脾脏心脏大脑胚胎肾脏肺膀胱骨脂肪成纤细胞人白细胞酵母拟南芥叶片烟草叶片玉米叶片样品量 1mg 1mg 1mg 1mg 1mg 1mg 1mg 1mg 1mg 1mg 10 5 10 5 10 5 1mg 1mg 1mg 总 RNA 含量 2-4 μg -2 μg 0- μg -1 μg - μg - μg - μg Evaluation only. Evaluation only. Created with Client Profile . Created with Client Profile . Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 2、方法及原理 RNA 的提取流程 1 、样本前处理 2 、细胞裂解 3 、 RNA 的纯化及获得 Evaluation only. Evaluation only. Created with Client Profile . Created with Client Profile . Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. RNA 提取流程-- 样品前处理注意点选择新鲜血液,不得超过 4小时选择新鲜的幼嫩组织选择处于生长旺盛的时期收集细胞选择新鲜组织,生长旺盛的组织 Evaluation only. Evaluation only. Created with Client Profile . Created with Client Profile . Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 可将新鲜血液先进行红细胞裂解,得到的白细胞然后加入一定量的 TRNzol ,-70 ℃保存较长时间去掉培养基,加入一定量 TRNzol -70 ℃保存较长时间推荐使用专门的 RNA 样品储存液进行储存液氮或加入 RNase 抑制剂中保存, 避免反复冻融 RNA 提取流程-- 样品前处理中如何保存样本 Evaluation only. Evaluation only. Created with Client Profile 5