环境消毒监测与验证.ppt

第一部分：洁净区清洁与消毒
第二部分：洁净室环境监测
第三部分：设备清洁
本章内容：
第一页，共八十页。
我们已经走得太远，以至于忘记了为什么而出发。
黎巴嫩 纪伯SA）配制的培养皿经采样后，在30 ℃ ～35℃ 培养箱中培养，时间不少于2d；
采用沙氏培养基（SDA）配制的培养皿经采样后，在20 ℃ ～25℃ 培养箱中培养，时间不少于5d。
GB/T 16293-2010 GB/T 16294-2010
第二十一页，共八十页。
细菌培养基上生长的真菌如何计数？
真菌培养基上生长的细菌如何计数？
微生物计数的困惑 ！
第二十二页，共八十页。
定义：在TSA（大豆酪蛋白琼脂）培养基上
生长的包括真菌的菌落形成单位总的
数量。
培养温度/时间： 1、细菌： 30～35℃ 5天。
2、细菌： 30～35℃ 2天；
霉菌或酵母菌： 20～25℃ 3天。
总好氧微生物数（TAMC）：
第二十三页，共八十页。
定义：在SDA（沙氏葡萄糖琼脂）培养基上
生长的包括细菌的菌落形成单位总的
数量。
培养温度/时间： 20～25℃ 5天。
酵母菌和霉菌总数（TYMC）：
第二十四页，共八十页。
1、TAMC时，如果真菌被发现生长，应该被
作为TAMC计数的一部分。
2、TYMC时，如果细菌被发现生长，应该被
作为TYMC计数的一部分。
3、当TYMC由于细菌的生长而超过了可接受
标准，应当使用含有抗生素的SDA培养基。
计数原则：
第二十五页，共八十页。
洁净室环境监测培养基的选择？（关键区域使用培养基的特殊要求）
第二十六页，共八十页。
洁净区微生物监测的动态标准
（GMP2011版）
第二十七页，共八十页。
CHP2010
第二十八页，共八十页。
《中国药典》2010年版 二部
附录XIX Q “药品微生物实验室规范指导原则”
用于环境监测的培养基须特别防护，最好要双层包装和终端灭菌，如果不能采用终端灭菌的培养基，那么在使用前应进行100%的预培养以防止外来的污染物带到环境中以避免出现假阳性的结果。
第二十九页，共八十页。
附录B:
培养基平皿培养及保存
制备好的培养基平皿宜在2～8℃保存，一般以一周为宜或按厂商提供的标准执行。采用适宜的方法在平皿上做好培养基的名称、制备日期的标记。
GB/T 16293-2010 / GB/T 16293-2010
第三十页，共八十页。
1、TSA
用于细菌取样。
培养温度/时间：30～35℃ 不少于2天。
2、 SDA
用于霉菌和酵母菌取样。
培养温度/时间：20～25℃ 不少于5天。
环境测试培养基：
第三十一页，共八十页。
3、用户认可并验证了的培养基。
以上摘自：GB/T 16293-2010
GB/T 16294-2010
环境测试培养基：
第三十二页，共八十页。
1、忽视洁净环境中的影响因素
2、忽视培养基的选择
环境监测中常忽视的两个方面：
第三十三页，共八十页。
（1）API 的残留
（2）消毒剂/杀孢子剂的残留
1、忽视洁净环境中的影响因素
第三十四页，共八十页。
抗菌素
药物活性成分
API
第三十五页，共八十页。
消毒剂/杀孢子剂
常见的化学消毒剂：
1、酚类
2、醛类
3、过氧化氢类
4、季***盐类化合物
5、以上混合物
第三十六页，共八十页。
（1）选择性低下，营养全面
（2）含有中和剂
（3）“无菌”平板培养基
2、忽视培养基的选择
第三十七页，共八十页。
营养琼脂
胰蛋白胨大豆琼脂（TSA）
培养基的选择
第三十八页，共八十页。
参见：“中国药典”2010年版 附录109页
附录XI J 表1：
“常见干扰物中和剂或灭活方法”
中和剂的使用：
第三十九页，共八十页。
青霉素酶（ β-内酰***酶）
可以有效的水解β-内酰***类抗生素。
包括：
- 青霉素G
- 氨基青霉素类，如氨苄西林、阿莫西林、