鳖甲煎丸通过HIF-1α ...调控巨噬细胞极化的机制研究 刘洋.pdf

中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
ISSN 1005-990 刘洋 1，何春雨 1，李彤 2，陈伟光 1，马琰昊 2，匡莹 2，贺松其 1，孙海涛 1*
（，广州 510515；，广州 510315）
[摘要] 目的：探讨鳖甲煎丸通过调控巨噬细胞极化防治肝纤维化的作用和机制。方法：运用血清药理学方法，体外培养小
鼠巨噬细胞 ，通过***化钴（CoCl2）刺激 细胞建立体外缺氧模型，将细胞随机分为空白组、CoCl2 缺氧模型
组（ 200 mmol·L -1）、鳖甲煎丸低（200 mmol·L -1+ g·kg-1 鳖甲煎丸）、中（ 200 mmol·L -1+ g·kg-1 鳖甲煎丸）、高（ 200mmol·L -1+
g·kg-1 鳖甲煎丸）和扶正祛瘀胶囊组（200 mmol·L -1+ g·kg-1 鳖甲煎丸）。采用细胞增殖与活性检测（CCK8）法检测各组细
胞增殖水平；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测巨噬细胞缺氧诱导因子 1α（HIF-1α）、白介素 1β（IL-1β）、
白介素 6（IL-6）基因表达水平；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测巨噬细胞极化相关蛋白与 HIF-1α/核转录因子-κB（Nuclear
factor-kappa B，NF-κB）信号通路相关蛋白表达水平；细胞免疫荧光检测 NF-κB 信号通路相关蛋白、HIF-1α 的分布及表达。结
果：与空白组比较，CoCl2 刺激 24 h 后， 细胞增殖受抑制明显（P<）；与模型组比较，用相应含药血清处理 24h
后，各用药组能促进 细胞增殖（P<）。与空白组比较，模型组 HIF-1α、IL-1β、IL-6 mRNA 表达均有明显升高（P<）；
与模型组比较，鳖甲煎丸与扶正祛瘀胶囊处理后能不同程度的降低巨噬细胞