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蔬菜中有机磷农药残留的快速检测
蔬菜中有机磷农药残留的快速检测
〔黄宽，2022级食品质量与平安专业〕
【内容摘要】有机磷农药作为一类高效、广谱的杀虫剂被广泛地用于农业、家庭以及仓储等的杀虫，能有效地控制害虫、杂草及细菌的生长碱酯酶的活性。 植物酯酶可以催化乙酸萘酯水解为萘酚和乙酸，萘酚与显色剂固蓝 B 作用形成紫红色的偶氮化合物,从而发生显色反响。

自从 1951 年发现有机磷农药在体外也能抑制胆碱酯酶以来,绝大多数研究都是基于动物胆碱酯酶这一原理进行的 。目前，胆碱酯酶法检测有机磷的方法主要有酶片法、酶抑制分光光度法以及胆碱酯酶生物传感器法。
〔1〕酶片法
酶片法是将敏感生物的胆碱酯酶和生色基质液经固化处理后加载到滤纸片或类似载体物质上，基质在胆碱酯酶的催化作用下迅速分解，生成胆碱(蓝色),使催化、水解、变色的过程发生改变。假设胆碱酯酶受到抑制, 基质就不能水解、不变色 ,说明样品中含有机磷和氨基甲酸酯类农药(呈阳性)。目前广泛使用的速测箱、速测卡法均属于酶片法。
近年来国内常见的用固化含有胆碱酯酶和靛酚乙酸酯试剂的试纸片建立的适合我国蔬菜中局部农药残留限量的现场监督检测的速测卡法 , 其检出限一般在 0 .3～ 3 .5 m g/kg , 检出时间为 15 min 操作简单,速度快 ,测试本钱低廉[。也有学者利用马血清中的乙酰胆碱酯酶与底物***化乙酰胆碱作用, 根据反响前后的 pH
值变化及指示剂的颜色变化情况 ,建立的一种可以作定性及半定量分析的酶片快速检测法 , 应用于实际检测黄瓜中农残的效果较好。
〔2〕酶抑制分光光度法
有机磷类农药对乙酰胆碱酯酶活性有抑制作用,浓度越高,抑制率越高。通过分光光度计测定吸光度随时间的变化值,并与空白对照比拟求得酶抑制率,从而判定样品中是否有有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。该法所需仪器设备简单、灵敏度高、前处理简单、检测时间短 , 可及时检测含农残的蔬菜。
曾有报道以鸡脑为酶源提取乙酰胆碱酯酶，利用酶抑制分光光度法检测油白菜中有机磷农药(对硫磷、辛硫磷、氧化乐果)的残留量，可使 3 种农药的回收率分别到达 97 %,、101 %和 99 %.Ingrid Walt 等从镰刀菌 pisi 中提取角质酶 ，利用酶抑制分光光度法和 96 孔板法同时检测多个样品中有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的含量，该法对毒死蜱和对氧磷的检测限分别为 2 .6 mg/L 和 0 .04 mg/L。
胆碱酯酶生物传感器
胆碱酯酶生物传感器法是目前农药残留速测技术中的研究热点 ,其在研究方法多样化、灵敏度、准确性、响应时间等方面都具有很大优势。
(1)电化学型：电化学型生物传感器是基于胆碱酯酶催化底物水解生成电活性物质的反响而构建。通常采用电化学氧化法直接测定生成的巯基胆碱或者先用胆碱氧化酶氧化生成的胆碱，进一步用电化学方法测量在此催化氧化过程中消耗的 O2 或生成的 H2 O2 .Andreescu 等以果蝇中提取的胆碱酯酶为酶源，以***酯为底物, Ag/Al 参考电极 , 研制了一种丝网印刷电化学传感器 ,其对对氧磷和毒死蜱的检测限分别为 5 .2 ×10-3 mg/L 和 0 .56 ×10-3