Western blot Western blot ? western blot 的基本原理?实验步骤?标准曲线的制作? western blot 产品? western blot 的应用?常见问题总结 western blot 的基本原理? Western Blot 采用的是聚丙烯酰***凝胶电泳,被检测物是蛋白质, “探针”是抗体, “显色”用标记的二抗。经过 PAGE 分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如***纤维素薄膜) (我们的是聚偏二***乙烯膜 pvdf )上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。实验步骤标准曲线的制作? BCA 蛋白定量检测法? lowry 蛋白定量检测法 western blot 产品?抗体稀释液(稳定剂,保护剂) ?蛋白定量试剂盒( BCA LOWRY) ?标准蛋白梯度?转印膜?内参抗体( beta-actin GAPDH ) ?酶标二抗荧光二抗? ECL 试剂盒(HRP 底物化学发光液) ?显色(胶片,定影粉,显影粉等) ?封闭应用常见问题总结
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