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细胞计数板使用方法计划
细胞计数板使用方法计划
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细胞计数板使用方法计划

细胞计数板使用方法
实验原理：当待测细胞悬液中细胞平均散布时，经过测定一定体积悬液中的细体达到母细胞大小一半时，即可作为两个菌体计算。每个样品重复计数2-3次（每次数值不应相差过大，否则应重新操作），按公式
计算出每mL（g）菌悬液所含细胞数量。
7．测数达成，取下盖玻片，用水将细胞计数板冲刷洁净，切勿用硬物洗刷或抹擦，省得损坏网格刻度。洗净后自行晾干或用吹风机吹干，放入盒内保存。
细胞计数板-计数公式
1、16格×25格的细胞计数板计算公式：细胞数/ml=100小格内细胞个数
/100×400×10000×稀释倍数
1、25格×16格的细胞计数板计算公式：细胞数/ml=80小格内细胞个数
/80×400×10000×稀释倍数
血细胞计数板计数的误差主要来自哪些方面应怎样尽量减少误差,力求正确
血细胞计数的误差分别本源于技术误差和固有误差。其中由于操作人员采血不顺
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3专业技术分享
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利，器材办理、使用不当，稀释不正确，细胞鉴别错误等因素所造成的误差属技
术误差；而由于仪器（计数板、盖片、吸管等）不够正确与精美带来的误差称仪
器误差，由于细胞散布不平均等因素带来的细胞计数误差属于散布误差或计数域
误差（filederror）。仪器误差和散布误差统称为固有误差或系统误差。技术误
差和仪器误差可经过规范操作、提高熟练程度和校正仪器而防备或纠正，但细胞
散布误差却难于彻底除掉。因此，搞好红细胞计数的质量控制一般需采用以下措
施。
1．防备技术误差，纠正仪器误差
1）所用器材均应清洁干燥，计数板、血盖片、微量吸管及刻度吸管的规格应吻合要求或经过校正。①计数板的判断：要求计数室的台面圆滑、透明，划线清晰，计数室划线面积正确。必要时采用严格校正的目镜测微计测量计数室的边长
与底面积，用微米千分尺测量计数室的深度。美国国家标准局（NBS）规定每个大方格边长的误差应小于1%，即1±，深度误差应小于2%，即±。若超过上述标准，应弃之不用。②血盖片应拥有一定的重量，平整、圆滑、无裂
痕，厚薄平均一致，可使用卡尺多点测量（最少在9个点），
之内。必要时采用平面平行仪进行测量与评论，要求体现密集平行的直线干涉条
纹。最简单的评论方法是将洁净的盖片紧贴于干燥的平面玻璃上，若能吸附一定
的时间不脱落，落下时呈弧线形旋转，表示盖片平整、厚薄平均。同时，合格的
盖片放置在计数室表面后，与支持柱紧密接触的部位可见到彩虹。精选出的盖片
与其他盖片紧密重合后，在掠射光辉下察看，如见到完整平行的彩虹条纹表示另
一枚盖片质量也吻合要求。③目前临床实验室多采用一次性微量采血管采集毛细
血管血，除注意定点购买使用信誉较好厂家的产品外，还应付每一批量的采血管
进行抽样检查，可经过水银称重法或有色溶液比色法进行校正，误差不应超过
±1%。
2）红细胞稀释液应等渗、新鲜、无杂质微粒。
3）严格操作，从消毒、采血、稀释、充池到计数都应规范，尤其应注意的是
血样稀释及充池时既要作到充分混匀，又要防备强烈震荡为损坏红细胞。必须一
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4专业技术分享
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次性充满计数室，防备产生气泡，充入细胞悬液的量以不超过计数室台面与血盖
片之间的矩形边缘为宜。
（4）报告法定计量单位。
2．缩小计数域误差或散布误差由于血细胞在充入计数室后呈随机散布或称Poisson散布（），而我们所能计数的细胞散布范围是有限的，由此造成的计数
误差称为计数域误差或散布误差。缩小这种误差的有效方法就是尽量扩大细胞计数范围和计数