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第九章核糖体 RIBOSOME RIBOSOME 第九章核糖体(ribosome) ?核糖体是合成蛋白质的细胞器; ?核糖体几乎存在于一切细胞内,不论是原核细胞还是真核细胞。?核糖体的类型与结构?多聚核糖体与蛋白质的合成?反义 RNA 与核酶细胞生物学生物与食品工程学院第一节核糖体的类型与结构核糖体是合成蛋白质的细胞器,其唯一的功能是按照 mRNA 的指令由氨基酸高效且精确地合成多肽链。?核糖体的基本类型与成分?核糖体的结构?核糖体蛋白质与 rRNA 的功能分析细胞生物学生物与食品工程学院一、核糖体的基本类型与成分?核糖核蛋白体,简称核糖体(ribosome) ?基本类型?附着核糖体?游离核糖体?70S 的核糖体?80S 的核糖体?主要成分?r蛋白质: 40% ,核糖体表面? rRNA:60%, ,核糖体内部?发现核糖体的两个关键技术细胞生物学生物与食品工程学院二、核糖体的结构?结构与功能的分析方法?蛋白质合成过程中很多重要步骤与50S 核糖体大亚单位相关细胞生物学生物与食品工程学院结构与功能的分析方法结构与功能的分析方法?离子交换树脂可分离纯化各种 r蛋白; ?纯化的 r蛋白与纯化的 rRNA 进行核糖体的重组装, 显示核糖体中 r蛋白与 rRNA 的结构关系?双向电泳技术可显示出 核糖体在装配各阶段中, 与 rRNA 结合的蛋白质的类型?双功能的交联剂和双向电泳分离可用于研究 r蛋白在结构上的相互关系?电镜负染色与免疫标记技术结合,研究 r蛋白在核糖体的亚单位上的定位。?对 rRNA ,特别是对 16S rRNA 结构的研究?70S 核糖体的小亚单位中 rRNA 与全部的 r蛋白关系的空间模型细胞生物学生物与食品工程学院?同一生物中不同种类的 r蛋白的一级结构均不相同,在免疫学上几乎没有同源性。?不同生物同一种类 r蛋白之间具有很高的同源性, 并在进化上非常保守。细胞生物学生物与食品工程学院?蛋白质结合到 rRNA 上具有先后层次性。?核糖体的重组装是自我装配过程二十世纪六十年代初期 Robert Perry 用紫外微光束破坏活细胞的核仁, 发现破坏了核仁的细胞丧失合成 rRNA 的能力,这一发现提示核仁与核糖体的形成有关。后来 Perry 又发现低浓度的放线菌素 D能够抑制 3H- 尿嘧啶掺入 rRNA 中,而不影响其他种类的 RNA 合成。显微放射自显影也显示放线菌素 D能够选择性阻止核仁 RNA 的合成,表明核仁与 rRNA 的合成有关。细胞生物学生物与食品工程学院? 16SrRNA 的一级结构是非常保守的? 16SrRNA 的二级结构具有更高的保守性: 臂环结构(stem-loop structure) ? rRNA 臂环结构的三级结构模型