心肌肥厚指标.docx

心肌肥厚是心脏对慢性压力或容量超负荷产生的靶器官反应，见于高血压心 脏病、肺动脉高压及慢性充血性心力衰竭等。心肌肥厚的基本变化不仅是心肌细 胞的肥大与增生，也有非心肌细胞如成纤维细胞、胶原细胞、血管细胞及蛋白质、 酶等的生成、增殖与增生，伴和下腔静脉用血管夹阻断血流。用9号针头 斜向上穿刺静脉壁，继续进针刺静一动脉联合壁。退出针头，9/0线缝合静脉壁 的创口。松开血管夹，下腔静脉变红则证实造痿成功。动静脉造痿后，动脉血流 入下腔静脉，回心血量增加，增加心脏容量负荷，最终导致心肌肥厚的发生。
［11、12］
，皮下注射每日2次，连续6周可引起左心室肥厚， 这一作用与其激活肾上腺素受体，增加心肌细胞合成代谢以及Ca2+超负荷有关。 ［14、15］
大量甲状腺素能提高人体基础代谢率，增强交感神经活动，增加心脏的负荷。 机体高甲状腺素状态，可促进心肌细胞mRNA和蛋白质的合成，从而使心肌肥 厚。-甲状腺素1mg/kg，连续7天。


在建立各种因素造成大鼠LVH模型基础上，急性处死大鼠，剖胸取出心脏， 灌流装置为Langendorff装置，逆行恒压灌注，灌注压为85cmH2O，灌注液为 Kreba-Hensele缓冲液。记录左心功能参数，包括左心室收缩压力(LVSP)、左心 室舒张末期压力(LVEDP)、左心室内舒张期压力最大变化速率(-dp/dt/pmax).左 心室内压最大变化速率(土dp/dt/pmax)。测定结束后，可观察心肌肥厚情况，并 观察心肌胶原网络重构或分离心肌细胞，测定心肌细胞Ca2+浓度等［6,16］。
［6］
无菌条件下取出生后2~4天SD大鼠心脏，将心室肌放入Hank’ s液中冲 洗3次后，剪成小块(约lmm2)，%的胰酶在磁力搅拌器的搅拌下分散细胞， 控制温度在37°C，每10分钟收集一次细胞，离心二次后将全部细胞置于含有 10%胎牛血清和90%DEME培养基的100ml培养瓶中，送入二氧化碳培养箱 (5%CO2和95%空气)中培养60~90分钟，根据差率贴壁法区别心肌细胞和非 心肌细胞，并加入Bromodeoxyurine以防残留非心肌细胞的生长。将生长于培 养板上静止了 48小时的心肌细胞的培养液倒掉，加入不同浓度的刺激剂如
ET, Ang II, L-NAME(NO合酶抑制剂)，NE, L-甲状腺素，内皮生长因子及胰岛素 等，模拟各种致肥厚因子在体体液因素的状态以形成心肌细胞肥厚，同时加入 [3H]thymidine和[3H]Leucine，用液闪仪测量，以分析DNA和蛋白的合成，同 时可运用成像系统和计算机处理，测定心肌细胞体积的大小，以判断心肌细胞肥 厚的程度。
该技术要注意防止污染和非心肌细胞的混杂，每孔心肌细胞数约为5X104 个。该模型可排除机体其它因素的干扰，可观察药物对心肌细胞的直接作用。但 分析药物作用的机制时，应考虑到离体心肌细胞肥厚与在体心肌细胞肥厚有一定 差异。
[6]
在建立LVH动物模型的基础上，可根据实验目的要求及仪器设备条件，选 择适合的观测指标[6]：
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