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植株成熟度与生长调节剂对黑喉石斛花芽诱导的影响
 
 
杨澜 王爱华 石乐娟
Reference：黑喉石斛在自然条件下从播种到开花需要3年左右的时间。为了研究黑喉石斛的开花过程，缩短开花年限，采用组织培养度为（23±2） ℃，光照度为 1 000～1 500 lx，光照时间为11 h/d。培养90 d后统计试管内花芽数量及组培苗的生长情况，计算花芽诱导率。
2 结果与分析
黑喉石斛的无菌播种
为获得不同生长时期的黑喉石斛无菌材料，本试验分3个阶段将黑喉石斛种子播种于1/2 MS+NAA萌发培养基上。通过观察发现，经过30 d左右的培养，种子可萌发形成原球茎，萌发率超过99%;经过50 d的培养，可分化生长出茎和叶。
黑喉石斛试管内花芽诱导及生长情况
从表3可以看出，HH1、HH2、HH3黑喉石斛经过6种组合的TDZ+PP333诱导处理60 d后，处于单叶幼苗期的材料及经过A1（TDZ mg/L+PP333 mg/L）、A2（TDZ mg/L+PP333 mg/L）处理后转入1/2 MS培养基生长90 d后出现花芽，花芽诱导率分别为5%、7%，其他处理及对照培养基中均未发现花芽。HH1、HH2、HH3经过处理后茎和叶营养器官的生长受到不同程度的抑制作用，表现为植株矮小，叶片小且数量少，茎长度缩短，生长迟缓。随着
TDZ与PP333浓度的不断升高，对植株的营养生长抑制作用增强。 mg/L时，叶片的分化受抑制，植株无法正常生长。PP333使HH1、HH2、HH3茎长度缩短，植株矮小。A1～A6 处理均在不同程度上影响黑喉石斛根、茎、叶的生长。无激素处理的对照植株相对于激素处理的植株生长速度更快，植株健壮。
继代培养对黑喉石斛花芽诱导的影响
从表4可以看出，在B1～B10及对照培养基中，HH1、HH2、HH3的继代苗在试管内生长情况不尽相同。低浓度的TDZ（ mg/L）与PP333（ mg/L）组合B1不仅无法诱导HH1、HH2、HH3的继代苗花芽形成，而且丛生芽少，植株生长缓慢。B6（TDZ mg/L+PP333 mg/L）、B8（TDZ mg/L+PP333 mg/L）、B10（TDZ mg/L）3种处理均能诱导HH1、HH2、HH3的继代苗形成花芽。B6处理HH1继代苗的花芽诱导率最高为40%，而B8、B10处理的花芽诱导率均低于10%（表5），且B8处理下容易出现畸形植株。其他的诱导培养基均无法诱导花芽生成，但对试管内壮苗、丛生芽增殖有一定的促进作用。B2、B3处理植株的丛生芽增殖率较高，可达到3～5倍;植株茎干增粗，叶片变宽，根部变粗且有根毛，生长健壮;适合3～4个月苗龄的黑喉石斛丛生芽诱导及壮苗培养。而B7、B8、B9处理中虽然也有丛生芽的增殖，但畸形苗较多，且部分叶片黄化，茎干基部出现不同程度的褐化。对照培养基中无花芽出现。
3 结论与讨论
试管内的石斛苗要完成营养生长向生殖生长的转变，除了要有适宜的培养基及培养条件之外，营养物质的有效积累也是决定其花芽分化是否成功的关键因素之一[12]。本试验中3种成熟度黑喉石斛材料，单叶幼苗期材料HH1，经过A1
（TD