老龄肾阳虚证的差异表达基因谱分析.doc

老龄肾阳虚证的差异表达基因谱阐发
　　李炜弘雍小嘉范怀昌谭从娥张天娥王米渠
　　【摘要】目的接纳基因表达谱芯片技能，阐发老龄肾阳虚证的产生与基因表达非常间的接洽。要领挑选肾阳虚证患者3名和正常比较者3名，接纳美国Affyetrix公司的Trizl法提取总RNA，并对总RNA举行定量、质检。
　　、生物素标识表记标帜法对样品举行靶标制备，然后用于芯片杂交；芯片接纳美国Affyetrix公司的HG-，每例样品检测1张，共6张。用FluidisStatin450举行洗脱和染色，然后用Sanner3000扫描芯片；用Genehipperatingsftare()阐发软件对芯片图像举行阐发，把图像信号转化为数字信号，然后dhip软件做校正和归一化处置惩罚，。
　　3效果
　　～70岁，按照前期研究订定的肾阳虚证量表评分体系［2］，结合成都中医药大学中医诊断学专家诊断效果，3例患者皆属于典范的老年肾阳虚证患者，2女1男，；3例康健老年人，2女1男，。其病症因子及各因子定量评分见表1。3例患者均以腰膝酸软、畏寒、肢冷、腰背发冷为重要病症，兼证有神倦怠耽头晕、***减退、夜尿频多、尺脉不敷等。3例患者皆属于典范的肾阳虚证患者，与3例康健比较有显着差异。
　　
　　表16例样本肾阳虚证各病症因子及其定量评分效果〔略〕
　　sh1，sh2，sh3为3例典范肾阳虚证患者，肾阳虚证半定量诊断总分值别离为36，29，36;h1，h2，h3为3例康健比较者，肾阳虚证半定量诊断总分值别离为3，2，5
　　表2肾阳虚证差异表达基因〔略〕
　　表3肾阳虚证特性差异表达基因〔略〕
　　图1肾阳虚证差异表达基因聚类图〔略〕
　　4讨论
　　、诊断、治疗、生理、生化、神经-内排泄-免疫调控等研究，提示该证很大概涉及一大群差异表达基因，拥有庞大而奇特的分子生物学内在［4］。基因芯片以大范围、高通量的方法可同时研究多个基因及多个基因组在种种生理病理状态下的表达，以相识基因及基因组之间的彼此作用和调控网络，有利于研究肾阳虚证产生的分子生物学基矗但基因芯片的结论受到样本量大孝样本同质性、芯片检测体系不变性、芯片效果阐发软件的实用性等多因素的影响，在所获结论上有较大的偏倚。限于经费有限，无法开展大样本的研究，故我们在实行方案上做了多方思量。起首接纳量表测评和专家诊断两种要领确定肾阳虚证患者，年事操纵在10年的区间，去除西医器质性疾病，尽大概包管样本的同质性；其次接纳美国Affyetrix公司的HG-，芯片检测体系［5］的可靠性和不变性在天下上都是较为公认的；末了接纳T查验组间比力挑选出肾阳虚证差异表达基因，较已往单张芯片间两两比力结论更为可信。
　　，本研究挑选出的34条差异表达基因中，有7条基因〔PTP4A1，PG1，AP2K4，TG3，BX，FHIT，DKN1〕都是与肿瘤的产生、按捺或转移相干的，