吡格列酮对内皮祖细胞增殖、凋亡及功能的影响的论文.doc

吡格列酮对内皮祖细胞增殖、凋亡及功能的影响的论文.doc吡格列酮对内皮祖细胞增殖、凋亡及功能的影响的论文

作者:邸春霞,陆庆明,郭文怡,王海昌,张荣庆,殷忠
【摘要】目的:观察不同浓度吡格列酮对大鼠骨髓源性内皮祖细胞(epcs)增殖、凋亡和功能的影响,并探讨其可能的作用机制. 方法:正常sd大鼠24只,随机分为a组(对照组)和b,c,d组[吡格列酮组剂量依次为10,20,40 mg/(kg·d)],灌胃处理10 d后断颈处死,密度梯度离心法获取骨髓单个核细胞,经鉴定后证实为epcs. 每组细胞培养4 d后消化、计数并用完全培养液培养. 24 h后检测no生成量,3 d后检测凋亡情况,7 d后检测增殖能力. 结果:与a组相比,b,c,d组epcs增殖能力明显增高[b,c,d组a490 nm分别为(±), (±), (±) vs a组a490 nm (±), p<];凋亡程度降低[b,c,d组分别为(±)%, (±)%,(±)% vs a组(±)%, p<];培养上清中no浓度显著提高[b,c,d组分别为(±), (±), (±) μmol/l vs a组(±), p<];与c组相比,b组和d组促进epcs增殖能力弱(p<),培养上清中no浓度相对低(p<). 结论:不同浓度吡格列酮均能提高epcs数量和功能;20 mg/(kg·d)吡格列酮对epcs的作用较强.
【关键词】吡格列酮;内皮祖细胞;糖尿病
0引言
血管内皮在心血管疾病发病机制中起重要作用,多种心血管疾病都伴有内皮功能障碍. 内皮祖细胞(epcs)是血管内皮的前体细胞,在特定应激条件下可分泌促血管生长因子并参与内皮修复和新生血管形成(包括血管新生和血管发生)[1]. 研究[2-3]发现,糖尿病患者的epcs增殖能力减退,体外黏附、形成毛细血管的能力也降低. 吡格列酮是一种噻唑烷二酮类胰岛素增敏剂,对2型糖尿病有较好的降糖效果和耐受性. 研究[4]表明,吡格列酮可以促进epcs介导的新生血管形成,但具体作用机制不明. 我们拟探讨体外培养条件下,不同浓度吡格列酮预处理对正常大鼠的骨髓源性epcs增殖、凋亡及功能的变化,为改善内皮损伤提供实验依据.
1材料和方法
,体质量70~80 g(第四军医大学实验动物中心);m199培养基(美国gibco公司);胎牛血清(美国hyclon公司);血管内皮生长因子(vegf,美国biovision公司);碱性成纤维细胞生长因子(bfgf,英国peprotech公司);乙酰化低密度脂蛋白(diiacldl,德国invitrogen公司);胰岛素和荆豆凝集素i(fitcueai,美国sigma公司);ac133和cd34(英国ebioscience公司); flk1(美国chemicon公司);淋巴细胞分离液(天津灏洋生物制品科技有限责任公司);no检测试剂盒(南京建成生物工程研究所);盐酸吡格列酮(成都宇洋高科技发展有限责任公司).