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农药残留检测分析技术进展
农药残留田间试验及取样
① 农药残留田间试验的目的和要求
② 农药残留田间试验的内容
a、农药残留动态试验
b、施药因素与最终残留量水平相关性
。
分析物 CH 键 + 硅胶表面官能团→吸附→ 极性溶液中的有机分析物→保留在SPE。
用非极性溶剂解吸吸附在固定相中的目标物质。
1、反相固相萃取原理
2、常用反相固相萃取柱
LC-18、LC-8 ：标准的单键合硅胶
ENVI-18、ENVI-8 ：聚合键合类填料
ENVI-Chrom P：苯乙烯：疏水
ENVI-Carb：含碳
（二）、正相固相萃取
流动相：非极性、中等极性
固定相：极性。
分析物质：极性、中等极性、非极性
① 极性官能团键合硅胶
LC-CN， LC-NH2， LC-Diol
② 极性吸附物质
LC-Si， LC-Florisil，
ENVI-Florisil， LC-Alumina
常用正相固相萃取柱
（三）、离子交换固相萃取
适用于带有电荷的化合物（水溶液、有机溶液）
原理：静电吸引，化合物上的带电荷基团与键合硅胶上的带电荷基团之间的吸引
分为：阴离子交换和阳离子交换
1 、阴离子（负电荷）交换
LC-SAX、LC-NH2：脂肪族季铵类盐 + 硅胶
2、阳离子交换
LC-SCX：磺酸基；LC-WCX：羧酸基团
SPE分离机制与溶剂的选择
分离机制
典型的弱溶剂
（保留条件）
典型的强溶剂
（洗脱条件）
反相SPE
缓冲液或低浓度的甲醇或乙***
乙***、甲醇或溶剂与水的混合物
正相SPE
正己烷、甲苯等
二***甲烷、甲醇等
阳离子交换SPE
低离子强度缓冲液(<)
高离子强度缓冲液（＞)
低反离子强度
高反离子强度
阴性离子交换SPE
低离子强度缓冲液（<)
高离子强度缓冲液(>)
固相微萃取装置
使用方法
气体萃取（顶空技术）
取样品基质（液体和固体）上方的气相部分进行色谱分析。
用途：痕量高挥发性物质的分析测定，气体是挥发性物质的最理想的溶剂。
静态顶空：在一个密闭的容器中，样品与样品上方气体（1/2）达到平衡。
动态顶空： “连续气体萃取”方法，不必两相达到平衡。经捕集浓缩后进行测定。
静态顶空过程
动态顶空过程
捕集阱中捕集浓缩。
“烘烤”：载气的流动方向与热解吸时的流动方向相反。
超临界萃取技术
超声波辅助萃取
能量→外部向内部→传递。
超声波使溶液形成气泡（空化效应）→爆裂→温度和压力↑，→增强化学反应能力。
生物大分子的细胞破碎与蛋白质的去除
细胞的破碎方法
物理法（物理作用）
① 反复冻融法： －15~－20℃。
② 冷热交替法： 90℃（数分钟）→冷却。
③ 超声波处理法：用于微生物。
④ 加压破碎法：
化学及生物化学法
① 自溶法： 在一定条件（pH、温度），
利用自身的酶系将细胞破坏。
② 溶菌酶处理： 具有专一地破坏细菌细胞壁的功能。
Antifungal activity
例：溶菌酶处理
蛋白质的去除
目的：蛋白质的存在，常常严重干扰分析
1、加热法 2、盐析法
3、膜分离法 4、高速离心
5、有机溶剂沉淀法
加热法
90℃→离心或过滤→除去热变性蛋白。
盐析法
原理：利用不同蛋白质在高浓度的盐溶液中溶解度不同程度的降低来沉淀除去蛋白质。
盐浓度
蛋白质溶解度
盐溶作用
盐析作用
膜分离法
超滤：靠薄膜两侧压力差分离
小分子化合物
大分子蛋白质
高速离心
靠物质沉降系数、质量、浮力因子等不同进行分离
小
中
大
净化（纯化）
样品经萃取→被测成分→萃取液→含有杂质→干扰测定。
※ 萃取液→适当处理→除去杂质→纯化。
浓缩和富集方法
（1）减压蒸馏：旋转蒸发器
（2）气流吹蒸：空气或氮气
（3） K-D浓缩器浓缩
（4）真空离心浓缩法
空气、氮气、浓缩、蒸汽压
氮吹仪
① 不能用于燃点低于100 ℃的物质
② 氮气、氧气纯度高于99%
③ 不能用于酸、碱物质的浓缩
④ 酸性用碳酸氢钠溶解中和
农药残留测定方法
薄层色谱法（TLC）
TLC始于1938年，方法的基本原理