植物组织培养的内生细菌污染问题.doc

植物组织培养的内生细菌污染问题
摘 要:植物组织培养过程中的外界环境即使保持了无菌状态,但是植物的组织或细胞间普遍存在着细菌,我们叫它内生细菌,这些内生细菌在培养过程中会对植物的生长造成一定的威胁,形成了内生细菌污染问题。本文植物组织培养的内生细菌污染问题
摘 要:植物组织培养过程中的外界环境即使保持了无菌状态,但是植物的组织或细胞间普遍存在着细菌,我们叫它内生细菌,这些内生细菌在培养过程中会对植物的生长造成一定的威胁,形成了内生细菌污染问题。本文对内生菌的种类、症状、危害和防治方法治疗做一些简单的说明,并对部分抗生素的使用做一些基本的讨论。
关键词:植物组织培养;内生细菌污染;防治方法
内生细菌污染一直是植物组织培养不可避免的问题,内生细菌是指在植物生长的某一阶段或者在植物的整个生长过程中在组织或者器官间存在的细菌,暂时在植物外表看来无明显症状,但是它可能会影响组织培养过程的发展,甚至可能是失败的因素,而且内生细菌可以被分离或者通过PCR技术扩增DNA证明内生细菌的存在。
一、内生细菌的种类
查阅文献发现被鉴定的种类主要有:黄单胞菌属(Xanthomonas)、芽孢杆菌属(Bacillus)、假单胞菌属(Pseudomonas)、土壤杆菌属(Agrobacterium)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、肠杆菌属(Enterobacter)、棒杆状菌属(Corynebacterium)、沙雷氏菌属(Serratia)、短小杆菌属(Curtobacterium)、欧文氏菌属(Erwinia)等。
二、内生细菌的症状及其危害
内生细菌的症状是在外植体培养后3~5d内未发生细菌污染,但以后会不断地出现明显或不明显的细菌菌落,这种情况就有可能是由内生细菌引起的污染。但有些症状比较明显,在2~3d就会在植物培养基或者植物组织周围形成颜色形状各异的菌群,均是由内生细菌污染引起。内生细菌的分布也很有意思,有一些在植物的组织中能达到50%左右的污染率,而有些在块茎,污染率能达到83%左右。
内生细菌引起的危害主要包括在早期导致培养失败,增殖效率的降低,培养物生长减缓,玻璃苗增加等。在后期导致试管苗移栽困难和死亡,有时污染也会引起培养物的遗传变异。植物病理学有研究显示,威胁最大的还是无症状内生细菌,他们在植物生长过程中毫无表现,但是当植物生长环境恶劣,植物整体免疫机能降低时内生细菌就会发作,威胁植物的生长,特别是在农作物等具有经济价值的组织培养时,造成难以估量的经济损失。
三、内生细菌的防治措施
總体来看,内生细菌的治疗手段的宗旨就是防大于治。在内生细菌的治疗上做到防治为君,治疗为臣的效果。以新生的嫩枝作为外植体,可以降低污染。首先,对植物的幼苗提前在处置或杀菌,例如,将田间采集植物枝丫用水彻底洗干净后插入无糖的培养液或自来水中等待发芽即可。还可以在无菌条件下对采自田间的枝条进行暗培养,待抽出徒长的黄化枝条时取材,也可以减少污染。主要是在细菌含量方面做减法,其次,使用温室或人工气候室内的植株接种材料,因为其表面内源细菌少而降低污染。如在采集外植体前用敌菌丹(captatol)或异菌脲(iprodione)杀菌剂处理田间的披散山龙眼母树,使污染从对照的90%减