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生化最终完美版.docx


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什么是基因表达?有何基本特征? 试述基因表达调控对生物体的重要~ 性。
生物基因组中结构基因所携带的 遗传信息经过转录及翻译,产生具有 生物学功能的产物(蛋白质、RNA), 这一过程称为基因表达。
基本特征(一)时间特异性:按 功能需要用硫 酸二甲酯(DMS)使DNA分子中的嘌吟 碱基G与A发生***化,被***化修 饰的G和A,会干扰DNA结合蛋白与 所在部位的DNA结合;***化的探针 可被化学试剂哌啶特异地切割,从而 得到不同分子量的DNA探针片段。而 与蛋白质结合着的DNA位点则不会被 切割。 4、报告基因分析是通过基因重 组方法将待测DNA序列与特异报告基 因相连,然后导入细胞中进行表达。 通过测定表达出的报告基因产物的 量,即可得知该 DNA 是否具有启动子 活性及启动子活性的高低。 5、染质免 疫沉淀分析(CHIP) CHIP是研究体内 DNA 与蛋白质相互作用的重要工具。 是基于体内分析发展起来的方法,它 能真实、完整地反映结合在DNA序列 上的调控蛋白。基本原理:在生理状 态下把细胞内的蛋白质和DNA交联在 一起,超声波将其打碎为一定长度范 围内的染质小片段,然后通过所要研 究目的蛋白质特异性抗体沉淀此复合 物,特异性地富集目的蛋白结合的 DNA 片段,通过对目的片断的纯化与 检测,从而获得蛋白质与DNA相互作 用的信息。
6、 常用的研究基因功能的万法有哪 些?
1、反义核酸技术是根据碱基互补 原理,用人工合成或生物体合成的特 定DNA或RN***段抑制或封闭基因表 达的技术。2、RNA干扰是一种由双链 RNA所引起的序列特异性基因沉默。3 基因敲除技术主要是指对一个结构已 知但功能未知的基因,应用DNA同源 重组原理,用体外构建的目的基因替 代靶基因片段,从而达到使靶基因失 活或缺失,然后从整体和活体水平上 观察构建的新个体所表现的性状,推 测相应基因的功能。4生物信息学是是 在生命科学研究中,以计算机为工具 对生物信息进行储存、检索和分析的 科学。
7、 什么是RNA十扰?简述其机埋和应 用领域。
RNA 干扰(RNA interference, RNAi) 是指在进化过程中高度保的、由双链 RNA(double-stranded RNA, dsRNA) 诱发的、同源 mRNA 高效特异性降解 的现象。这种有siRNA介导的基因表 达抑制作用被称为RNA干扰
其作用机理: RNAi 是通过长度为 21〜23nt的小RNA分子介导实现。这 种小 RNA 分子被称之为小干扰 RNA (siRNA)。 siRNA 由 Dicer 酶切割双链 RNA产生。Dicer属于RNaselll家族成 员,是双链 RNA 特异性核酸内切酶。 siRNA与RNA诱导沉默复合体(RISC) 结合,激活RISC。RISC的成分:Dicer、 Argonaute 酶、 TRBP 结合蛋白。活化的 RISC 中的 siRNA 反义链引导与 mRNA 结合, AGO2 剪切 mRNA。 RNAi 具有放 大效应。
其应用领域: 1. RNAi 作为一种强有力 的研究工具,用于功能基因组的研究; 细胞水平的基因敲除。 2. RNAi 应用于 基因治疗(抗感染、抗肿瘤等)。体内 小 RNA 分子的作用:抗病毒功能、基 因调控、染色质浓缩、转座子沉默、

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  • 时间2022-08-12