尿中血管内皮生长因子表达与膀胱移行细胞癌术后监测.pdf

尿中血管内皮生长因子表达与膀胱移行细胞癌术后监测研究生周春文专业泌尿外科导师徐祗顺教授刖吾膀胱移行细胞癌韵录虺瓢螂装是泌尿系统中最常见肿瘤,复发率高Ⅲ。因此,膀胱癌的早期诊断和术后定期随访监测十分重要。膀胱镜检查一直是最重要的检测手段,是诊断膀胱癌的金标准,但具有花费高、病人痛苦大、有创伤性等不利因素。,随着对肿瘤生物学行为基础研究的不断发展,人们把肿瘤的形成发展大体分为两个阶段,即肿瘤的克隆性增殖和继之发生的血管生成支持肿瘤持续生长阶段。其中第二阶段与肿瘤的浸润、转移、复发密切相关,在此阶段中,人们发现了一种重要的肿瘤血管生成调节因子,即血管内皮生长因子最初从牛垂体滤泡增殖细胞条件培养液中获得氨基酸序列一致,是最直接的血管内皮细胞素,通过其受体介导其活性。,以旁分泌形式发挥其作用。人基因全长血管渗透因子俜至
,有鐾庀宰蛹个内含子,按编码剪接方性篮白形式存在,研究最多;而。、舨蝗苄缘鞍祝正常机体中仅存在于心肌、肺、肾、肝、卵巢及功能。是肿瘤血管生成最重要的刺激因子”谀浴⑽浮乳腺、膀胱、肾等肿瘤组织中『岛表达‘⋯。疊研究并肯定了在膀胱癌血管生成中的作用,蛑な礦惚诱导的肿瘤血管生成,阻制了肿瘤的浸润和生长:王贵齐””经动物实验证实,抗体对肿瘤转移有显著性抑制作用。总之,不仪在膀胱癌组织中高表达,而且是肿瘤复发、侵润、预后的重要标忐,抗治疗是肿瘤治疗的一个新方”⋯还研究了在棘中表达情况,认为尿丰要来源于肿瘤组织尤其是膀胱癌,有明显的相关性,尿的高表达与复发关系密切。国内尚未见尿与膀胱癌相关关系的研究,本课题的目的即是探讨尿与膀胱移行细胞癌之间的关系,以及尿做为膀胱癌术后随访监测瘤标的价娌籌刮,有执嬖谛问剑渲蠽ぃぁ寓騄溶合于细胞膜及基底膜。活问绞嵌蚣拥耐炊聚体,单体分子量~,总蛋白分子量。受体属酪氧酸激酶族,”、”,但水平极低,仅维持正常的血符密度和基木渗透浅性膀胱癌复发及预后的有价值指标;緇”等通过抑肯向。值。.,.
资料与方法俅沧柿嫌敕肿螂滓菩邢赴┳以下简称膀胱癌组T发癌,不伴肾或输尿管病变。其中男例,女炅岁,平均岁。按分类法,浅表性癌、、期例,浸润性癌阂籘例,按病理诊断分级,级例膀胱癌术后每鲈碌玫剿娣靡淮巍例复发,其中个月复发~】鲈赂捶例例,女。其他恶性肿瘤组共例,男例,女炅陗岁,平均岁。前列腙癌、乳腺癌、大肠癌各鐾附邢赴癌辞旨吧鲇、肺癌、肝癌、胃癌、淋巴肉瘤、恶性黑色对照组谀蛳盗夹约膊」瞭例;年龄岁~岁,平均岁。其中肾输尿管结石欢嗄疑黾傲性前列腺增生症各幻谀蛳到岷恕⑸鲂∏蛏鲅住⒓毙陨鲇凵炎、输尿管丌口囊肿、肾盂输尿管连接处狭窄各健康对照例,女炅辍辏骄辍尿标本采集肿瘤组取自术前,随访时取自膀胱镜检查前。尿脱落细胞学检查之尿标本为晨起后第二次之新鲜清洁尿,立即送检,连续欤耗騐觳樵蛉卸纬磕虮存于。时内加蛋白酶抑制剂并转/分钟离心分钟,上清液可在一℃保存隆结果判定膀胱镜检查十活检为诊断金标准:有病理刍粜级例,.
者,为最后诊断,并分级。尿脱落细胞学检佥一次阳性即判阳忡:/结果由抗体夹心ǘ考觳狻尿检测方法嵋J约廖C烙腟公司仪器为微量滴定板读数仪,为上海笫治鲆荍生产的一紫外可见分光光度计。饕T砑安街杩固逶忠、ㄖ用溶液配制捕获抗体溶液,使其浓度为液器向⒘康味ò逯忻靠准尤浜萌芤海室温中温育过夜。再用去离子水或蒸馏水充满平板每孔,轻倒入污水槽,重复清洗我陨稀封闭包被后之微量滴定板:以塑料洗瓶将封阻液加入每孔,室温放置分钟,州水清洗同上清沈步骤W吓拇蛞云ゲ幸骸用封阻液配制待测抗原稀释液,并向每个包被孔中加测抗原稀释液,窒温温育以上。洗板:先用水清洗危靠字卸技尤敕庾枰海谝≡群笫温放置分钟,再水清洗尾⑵幸骸洗板。每孑以微龟滴定板读数仪定量测定,根据吸光度,由标准曲线可甋,牟饬磕颉⑻逡褐的商品试剂盒,购自中篒生物技术公司本:主蛰要原理见图;静僮鞑街枞缦拢用菏霾痘窨固迦芤喊籬⒘康味ò澹杭创佣嗟酪弹或摇动使其均匀分布,塑料保鲜膜封好,温育或后孔口向谥健篒加入挂籄剂N铮椅路胖底物溶液,室温放置≥。查出待测抗原浓度。痬畉.
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结果质量控制屎细胞学检查及尿测定由固定的两位检品试剂盒已对标本采集、实验操作,外来十预进行了质量控量,表达为/苊饽蛏秆埂⒛蚺ǘ榷允笛橛跋臁统计学处理计量资料各组数据均以表示,两组问计曲线评价。两种诊断方法效果比较用騐皆诟髯榈谋泶锴榭表南表芍#騐皆诎螂装┳槲.±./,在对照组为./0螂装┳槟騐子牒罅秸叻直鸨冉希屑灾性差斤值均小于话螂装┳橛雑螂装┳后两者总和,尿为.±./比较,同样有极显著性差异.。其他恶性肿瘤组尿与对照组尿水甲比较,