1、总氮量的测定——凯氏定氮法.ppt

实验四总氮量的测定——凯氏定氮法
目的和要求
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,包括标准梳酸铵含氮量的测定、未知样品的消化蒸馏、滴定及其含氮量的计算等。
实验原理
天然有机物(如蛋白质、核酸及氨其酸等) 的含氮量用凯氏定氮法来测定。
当天然含氮有机物与浓硫酸共热时,分解出氮、二氧化碳及水。氮转变出的氨与硫酸化合生成硫酸铵。分解反应进行得很慢,可加入硫酸铜及硫酸钾或硫酸钠促进之,其中硫酸铜为催化剂,硫酸钾或硫酸钠可提高消化液的沸点。氧化剂过氧化氢也能加速反应。
消化完了后,在凯氏定氮仪中加入强碱碱化消化液,使硫酸铵分解,放出氨。用水蒸汽蒸馏法,将氨蒸入过量标准无机酸溶液中,然后用标准碱溶液进行滴定,准确测定氨量,从而折算出含氮量。
以甘氨酸为例,该过程的化学反应如下:
测定时常用硼酸溶液收集氨,氨与溶液中的氢离子结全,生成铵离子,使溶液中氢离子浓离降低。然后再用强酸滴定,直至恢复溶液中原来氢离子浓度为止。所用的强酸的当量数即相当于被测样品中氨的当量数。
-。相对误差应小于±2%。
试剂
①浓硫酸
②硫酸铜
③硫酸钾
④氢氧化钠溶液:400g/L
⑤硼酸吸收液:40g/L,称取20g硼酸溶解于500mL热水中,摇匀备用。
⑥ HCl标准溶液:。
⑦***红-溴甲酚绿混合指示剂:5份2g/L溴甲酚绿95%乙醇溶液与1份2g/L***红乙醇溶液混合均匀。
主要仪器:
如图,凯氏定氮蒸馏装置。
50mL消化管
50mL容量瓶
分析天平
电炉
小玻璃珠
3mL微量滴定管
烘箱
1000mL蒸馏烧瓶
远红外消煮炉
实验流程
样品消化
蒸馏吸收
滴定
实验流程
样品消化
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准备4个50ml的凯氏烧瓶,并标号,向第1、,催化剂(K2SO4-CuSO4·5H2O)200mg,消化液5mL。注意加样品时应直接送入烧瓶底部,切勿沾于瓶口及瓶颈上。向3、,作为空白对照,测量试剂中可能含有的微量含氮物质,以对样品进行校正。
小心摇匀后,按图安装消化装置,置于电炉上,在通风橱内加热消化。
消化时先以小火缓慢加热,待内容物完全炭化、泡沫消失后,加大火力保持瓶内液体微沸,消化至溶液呈蓝绿色透明后,,取下冷却,小心加入20mL水,移入100mL容量瓶中,用少量水洗定氮瓶,并入容量瓶中,再加水至刻度,混匀备用。同时做试剂空白试验。