抗剑麻斑马纹病基因的克隆及表达载体的构建.pdf

·’:篜·■●
彤
江帮寻乙獾落晔日暌自驴鼋乙论文作者签名:弘罚逞海南大学学位论文原创性声明和使用授权说明日期:日期:◇原创性声明学位论文版权使用授权说明日期:心口提交‘高校学位论文全文数据库”中全文发布,并可按“章程”中规定享受相关权益。凰意途塞埕銮卮澄卮;旦圭生;巳鷌巳三生蕴查。,、本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品或成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律结果由本人承担。本人完全了解海南大学关于收集、保存、使用学位论文的规定,即:学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权海南大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本人在导师指导下完成的论文成果,知识产权归属海南大学。保密论文在解密后遵守此规定。论文作者签名:本人已经认真阅读“咝Q宦畚娜氖菘夥⒉颊鲁獭保饨ū救说难宦畚日导
摘要原诱导型启动子协佗簟穑稍斐芍猜榍樘镌缙诖罅咳敝辏看蠓档停菇瓾T诤笃谧鼋B榭共∽;蚴保陨峡捎糜诒冉献槌尚捅剑麻,是我国和世界热带地区最重要的纤维作物,用途广泛,综合价值巨大,利用前景广阔。斑马纹病是剑麻生产上严重的病害,它是由烟草疫霉菌皌麻生产受到重创。本文通过分子生物学技术,筛选克隆出两个抗烟草疫霉菌的基因及一个病原诱导型启动子,经转入毕赤酵母挥钠鯬表达蛋白,初步验证其功能后,构建植物双元表达载体,为以后的剑麻抗病转基因提供物质基础和科学依据。主要研究结果如下:ü贕中检索,设计特异引物,成功从烟草锌寺〕隽瞬诰财却淼乃ㄉ苐校ü崛,逆转录,克隆出目的抗病基因彳己。同时,人工合成了另一抗病基因。菇ń湍副泶镌靥錺.、.瓾缁髯;铣嘟母,同时转化空载体作为对照。转基因毕赤酵母,通过回收其表达蛋白的菌液,进行浓缩后接种烟草叶片,结果表明瓵疓表达的蛋白引起了烟草的反应。晒Φ墓菇撕≡盏夹推舳雍涂共』虻闹参锼1泶镌靥.,—瓾M保ǹ病基因转入载体校菇ū泶镌靥錺一和达与病原诱导型表达对剑麻影响的差异。关键词:剑麻斑马纹病烟草疫霉毕赤酵母
甌琽甌...琩甒,猺琣:,痗痑琲瓸瑃,瓾甌瓵甇瑃¨
录目┰銎舳有擦站⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。国内外剑麻育种研究状况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.植物抗真菌病害基因的研究利用综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..共』虻纳秆毕赤酵母表达系统⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.铣嘟湍副泶镏柿R籶主要试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..剑麻及其生产概况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯剑麻斑马纹病⋯⋯⋯⋯⋯:⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.参镉盏伎共⌒⒄辜坝诺恪植物表达载体⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯实验目的和意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯技术路线⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..笛椴牧稀质粒与菌株⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..渌主要仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.主要溶液的配制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..陡惺芴闹票福篒方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.舳踊騂的...:;⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
目的基因⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.基因的.;≡〉⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯目的基因⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.┧笾柿墓菇ā康幕騂.┧⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...刈楸泶镌靥錺缱;⑸溲滩菁ā植物表达载体的构建⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..┧⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..崧塾胩致邸结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯