安捷伦HPLC培训资源学习课程.pptx

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优化流路减小死体积
流路自上而下
堆积配置
手执控制器
检测器
柱温箱
自动进样器
泵
脱气机
溶剂柜
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第一页,编辑于星期日:十四点三十九分。
2
指示灯状态
每个部件接通电源后
LED灯显示绿色
关机poweroff
准备进样poweron
没准备好NotReady
运行Run
故障Error
驻留Resident
Blink
仪器LED
状态显示
电源开关显示
黑Black
黑Black
黄Yellow
绿Green
红Red
黄闪烁Yellowblinking
6种LED仪器状态:
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第二页,编辑于星期日:十四点三十九分。
3
准备流动相
流动相应该:
HPLC级
过滤(,)
脱气,尤其在低流速时
相容
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第三页,编辑于星期日:十四点三十九分。
4
溶剂过滤
不干净的溶剂或在溶剂瓶中长菌的溶剂会阻塞溶剂过滤器,降2003-5-6低泵的操作性能。
遵从下列建议可以提高性能,延长溶剂过滤器的寿命:
使用无菌溶剂瓶避免溶剂长菌。
用滤膜过滤溶剂去除微生物。
每两天更换或过滤溶剂。
避免溶剂瓶直接日照。
-。
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第四页,编辑于星期日:十四点三十九分。
5
选择合适的滤膜
聚四***乙烯滤膜:适用于所有溶剂,酸和盐,并无任何可溶物。
醋酸纤维滤膜:适用于水基溶剂,不适用于有机溶剂,推荐用于蛋白质和其相关的样品。
尼龙66滤膜:适用于绝大多数有机溶剂和水溶液,可用于强酸、70%乙醇、二***甲烷、不适用于DMF二***甲酰***。
再生纤维素滤膜:具有蛋白质吸收低,同样适用于水溶性样品和有机溶剂。
注意:1,每张滤膜只能用一次。
2,水相和有机相不要搞混。
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第五页,编辑于星期日:十四点三十九分。
6
TheGoodUser
下列优良/常规实验操作能够最大限度降低维修费用:
清洁的仪器,流动相和样品;如果必要,进行过滤。
保证溶剂的相溶性。
仪器使用完毕,冲洗整个系统,去掉盐份,防止污染。
对仪器的维护和保养进行记录。
定期使用异丙醇冲洗系统。
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第六页,编辑于星期日:十四点三十九分。
7
名称
乙酸
***
乙睛
苯
丁醇
四***化碳
***仿
环己烷
环戊烷
二***乙烷
二***甲烷
二***甲酰***
二***亚砜
二氧六
乙酸乙酯
乙醇
***
庚烷
正己烷
甲醇
甲乙***
1-辛烷
戊烷
1-丙醇
三***乙烷
四氢呋喃
甲苯
乙酸
Acetone
Acetonitrile
Benzene
CarbonTet
Chloroform
Cyclopentane
ButylAlcohol
Cyclohexane
Dichloroethane
CHCl
22
DMF
DMSO
Dioxan
Ethylacetate
EthylAlcohol
Di-Ethylether
Heptane
Hexane
MethylAlcohol
MEK
I-Octane
Pentane
I-PropylAlcohol
Di-Propylether
CH
22
Cl
4
THF
Toluene
Trichloroethane
Water
Xylene
三***甲烷
水
二甲苯
2-丙醚
Immiscible
Miscible
溶剂的相溶性
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第七页,编辑于星期日:十四点三十九分。
8
溶剂信息
避免使用下列对不锈钢有腐蚀性的溶剂:
卤化物碱金属溶液和相应的酸溶液。
高浓度的无机酸例如:***和硫酸。
能够形成卤素自由基或酸的***化试剂及其混合物。
含有过氧化物的色谱级醚必须用氧化铝干燥剂。
在有机溶剂中的有机酸溶液。
含有强络合剂的溶液。
四***化碳和异丙醇或THF混合液。
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第八页,编辑于星期日:十四点三十九分。
9
c
c
UV截止波长(nm)
乙睛
190
水
190
环己烷
195
己烷
200
甲醇
210
乙醇
210
***
220
二***甲烷
220
***仿
240
四***化碳
265
四氢呋喃
280(220)
甲苯
285
所以在使用紫外检测器时,所用波长应至少比所用溶剂的截止波长大20nm以上。
在使用紫外检测器时,所用波长与所用溶剂的截止波长接近(或低于截止波长)时,容易产生噪音干扰,从而影响检测结果。
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第九页,编辑于星期日:十四点三十九分。
10
生色团和最大吸收波长
生色团
分子式
实例
最大吸收波长(nm)
羰基(***)
RR‘C=O
***
271
羰基醛
RHC=O
乙醛
293
羧基
RCOOH
醋酸
271
酰***
RCONH2
乙酰***
208
次乙基
RCH=CHR
乙烯
193
亚次乙基
RC=CR
乙炔
173
睛
RC=N
乙睛
<160
硝基
RNO2
硝基甲烷
271
溶剂、PH、温度等都会影响生色团的最大吸收峰的强度和位置。
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第十页,编辑于星期日:十四点三十九分。