家蚕LDLRD蛋白的表达探究及其亚细胞定位.pdf

浙江理工大学
硕士学位论文
家蚕LDLRD蛋白的表达分析及其亚细胞定位
姓名:刘丽丽
申请学位级别:硕士
专业:生物化学与分子生物学
指导教师:张耀洲
20090301
摘要小鼠等的低密度脂蛋白受体同源,因此,将其命名为家蚕低密度脂蛋白受体基因——低密度脂蛋白受体,且恢窒赴砻嫣堑白,主要功能是结合并内吞诘ü檀即恢衅鸸丶饔谩5盠δ苋毕菔笨傻贾家族性高胆固醇血,霸绶⒐谛牟 K孀哦缘兔芏戎鞍受体研究的不断深入,将有助于进一步了解高胆固醇血症及动脉粥样硬化等心血管疾病的发病机制和指导临床治疗。目前人们对基因表达的研究主要集中在人、兔、鼠上。因此,进一步研究在其他动物胆固醇平衡中的作用,以及进一步阐明的表达调控机制都将具有十分重要的意义。从本实验室构建的家蚕蛹文库中获得一条序列,经同源比对分析,与人。锹己攀荈淇7旁亩量虺ざ,编码由霭被岵基组成的肽链。经砑治銎浞肿恿课甮鹊绲阄.。根据序列设计铮⒎直鹨珠蚲盖形坏悖琍产物双酶切后连入原核表达载体质粒晒Φ墓菇酥刈橹柿一一。将重组质粒转入大肠杆菌弥张ǘ任的诱导表达,裂解菌体作狿治觯笥业奈恢糜幸惶跆匾煨缘鞍滋醮朐て谥融合标签喾H诤蛋白先后经肿由覆阄黾癗缀椭炕竦么炕娜诤系鞍住S么炕融合蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体,ú獾每固逍Ъ畚猯:@枚嗫寺抗体对家蚕细胞醒窍赴ㄎ唬峁砻鰾主要分布于细胞质中。同时也进行了荧光定量治霾煌橹案鞣⒂逼诟没虻谋泶锊钜欤磕诓窝∮,结果显示在各组织中,脂肪体表达量最高,***表达量次之,中肠中的表达量最低;在卵、幼虫、蛹和蛾四个发育时期中,蛾的表达量最高,蛹次之,卵中较少,幼虫中表达量最少。本研究第一次对类家蚕的低密度脂蛋白受体进行了克隆表达及功能的研究,为今后家蚕低密度脂蛋白受体的研究创造了条件。关键词家蚕;低密度脂蛋白受体;原核表达;亚细胞定位;荧光定量浙江理笱学位论文
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日期:刎年隆蜤学位论文作者签名:刹翩翮浙江理工大学学位论文原创性声明本人郑重声明:我恪守学术道德,崇尚严谨学风。所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已明确注明和引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写,我对所写的内容负责,并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。浙江理工大学硕宦畚
日期:矽’’旯拢热学位论文作者签名:刹两尺觚日期:五祈年莎日浙江理工大学学位论文版权使用授权书不保密一。学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅或借阅。本人授权浙江理工大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于,在年解密后使用本版权书。指导教师签名:保密口浙江理工大学硕士学位论文
低密度脂蛋白受体综述第一章琯/】,极低密度脂蛋白受体Ⅳ藓虯闹鞍祝湫闹唷!V饕J堑ü,其功能是摄取胆固醇,供细胞生长发育,以及降解血浆中的盅=拖赴诘ü檀嫉自身稳定闙⑾职籽2』颊甙榈偷ü檀佳Vⅲ佣鹑嗣嵌訪及甊的研究】。在细胞内含有网格蛋奶厥獗荒ゑ记中有一系列细胞表面膜受体,通过受体接到的细胞内吞作用将大分子物质运输到胞内,这些受体有很强的分子结构相关性,组成低密度脂蛋白受体超家族。这一受体超家族的成员按发现顺序分别为,相关蛋刂鞍譋受体瞧渲凶钪匾5囊恢郑涔δ苁堑鹘诘ü檀嫉奶迥谄胶狻5ü檀疾荒芤游离的形式存在于血清中,只能以胆固醇酯的形式由脂蛋白携带运输以供细胞利用。低密度脂蛋堑ü檀荚耸涞淖钪饕5脑靥錥。结合蛘吆衅渌谥鞍中,唤到獬砂被幔ü檀急凰嵝怎ッ杆馕S卫氲ü檀冀氚挠卫氲ü醇池处【C扛,完成一次循环回到细胞表面。这一过程是连续的自发的,即使受体没有结合帕#庖荒谙莨桃不岱⑸0雌鞴僦亓客扑悖サ腖被肝脏摄取。因此近乎%的循环筛卧嗲宄渲ヒ陨鲜强縇揪丁K以对于调节胆固醇的体内平衡、调节血浆总胆固醇浓度起关键性的作用。血浆中的胆固醇主要存在于校鳯主要通过介导进入细胞降解成蛋白与胆固醇,细胞膜对游离胆固醇主要