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DOI:.1672-
·论著·
新乡地区支气管哮喘患儿发病风险与相关核转录因子
等位基因间相关性探讨
郭丽娟
(河南省新乡市第二人民医院儿科,河南新乡457300)
摘要:目的探讨新乡地区支气管哮喘患儿发病风险与相关核转录因子等位基因间相关性。方法本次研究纳入河南省
新乡市第二人民医院2018年1月至2020年1月收治的小儿支气管哮喘患儿260例和体检健康儿童290例,采用SSP-PCR法检
测核转录因子STAT3基因单核苷酸多态性(SNP),分析两组基因型和等位基因分布差异。结果支气管哮喘组rs2293152位
点CC基因型比例高于体检健康组(P<);支气管哮喘组rs2293152C/G位点C等位基因比例高于体检健康组(P<);
^
(OR=,95%CI:~)。两组rs957970位点基因型和等
位基因比例比较,差异无统计学意义(P>)。结论本地区小儿支气管哮喘发病与STAT3基因rs2293152C/G位点有关,
其中C等位基因可能为常见易感基因。
关键词:小儿;支气管哮喘;核转录因子;等位基因
中图分类号:
Relationshipbetweenincidenceofbronchialasthmaandallelesof
relatednucleartranscriptionfactorsinchildren
GUOLijuan
(DepartmentofPediatrics,theSecondPeople'sHospitalofXinxiang,Xinxiang,Henan457300,China)
Abstract:【Objective】Toinvestigatetherelationshipbetweentheincidenceofbronchialasthmainchildrenandallelesof
relatednucleartranscriptionfactorsinchildreninXinxiangofHenanProvince.【Methods】Atotalof260childrenwithbronchial
asthmaand290healthychildreninphysicalexaminationwereretrospectivelychosenintheperiodfromJanuary2018toJanuary
-PCRandthedifferencesofgenotypeandalleledistributionof
thetwogroupswereanalyzed.【Results】TheproportionofCCgenotypeinrs2293152locusofasthmagroupwassignificantly
higherthanthatofhealthygroup(P<).TheproportionofCalleleinrs2293152C/Glocusofasthmagroupwassignificantly
higherthanthatofhealthygroup(P<).
(O^R=,95%CI:–).Therewasnosignificantdifferenceingenotypeandalleleproportioninrs957970betweenthetwo
groups(P>).【Conclusion】Thers2293152C/GlocusofSTAT3geneisassociatedwiththeonsetofbronchialasthmain
childreninthisregionandCallelemaybethecommonsusceptiblegene.
Keywords:children;bronchialasthma;nucleartranscriptionfactor;allele
支气管哮喘是儿科常见慢性呼吸系统疾病之认为支气管哮喘发生受多种因素综合影响,除环
一,有报道显示14岁以下人群发病率约为3%~境因素外遗传因素亦在其中发挥着关键作用[2]。
4%;目前该病已成为影响儿童生长发育重要疾病,核转录因子STAT3已被证实可参与到人体正常生
给家庭及社会和带来极大负担[1]。目前有关支气理、感染及肿瘤病理生理改变;有报道证实不同
管哮喘病因及发病机制仍存在争议,大部分学者免疫系统疾病发生可由相同基因多态性介导并能
收稿日期:2022-01-12
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··


够相互影响疾病通路调节[3];、通用反向引物1μL、2×PowerTaq
、DNA模板2μL,最后加入ddHO补
2
关[4]。基于以上证据,本次研究纳入河南省新乡足25μL。rs2293152反应条件设置:95℃预变性
市第二人民医院2018年1月至2020年1月收治5min,95℃变性30s共8个循环,60℃退火45s,
的小儿支气管哮喘患儿260例和体检健康儿童29072℃延伸45s;95℃变性30s共25个循环,50℃
例,采用SSP-PCR法检测核转录因子STAT3基因退火45s,72℃延伸45s,最后72℃延伸5min。
单核苷酸多态性(SNP),探讨本地区小儿支气管rs957970反应条件设置:95℃预变性5min,95℃
哮喘发病与相关核转录因子等位基因间的关系,变性30s共35个循环,50℃退火45s,72℃延伸
现报道如下。45s,最后72℃延伸5min。

1资料与方法μ
脂糖凝胶(15g/L),电泳仪电压设定110V,电泳
,采用耶拿UVPGelstudiotouch凝胶成像仪
本次研究纳入河南省新乡市第二人民医院显像。

患儿260例和体检健康儿童290例;支气管哮喘抽样选取3分样本采用质控正向引物和通用反向
患儿中男148例,女112例,年龄4~9岁,平均引物扩增,扩增产物包含SNP位点,产物送至英
(±)岁;体检健康儿童中男158例,女潍捷基完成直接测序,将测序SNP位点基因型结
132例,年龄4~8岁,平均(±)岁。两果和SSP-PCR检测结果对比验证。
组性别和年龄比较,差异无统计学意义(P>),
具有可比性。,计数资料以百
(%)表示,比较采用χ2检验;相对危险度
支气管哮喘组:均符合儿童变应性哮喘诊断
≤评估采用优势比法。P<。
及分度标准[5],年龄14岁,同时排除川崎病、炎
2结果
症性肠病及其他免疫系统疾病;体检健康组:年
≤
龄14岁,近4周无感染或发热,-W遗传平衡检验分析
激素或免疫抑制剂,既往过敏或其他免疫系统疾H-W遗传平衡检验分析显示,对照组STAT3
病史。研究方案经河南省新乡市第二人民医院伦基因两个SNP位点基因型分布频率比较,差异无
理委员会批准,且患儿家长知情同意。统计学意义(P>),提示纳入研究对象具有群
。

2mL加入EDTA抗凝管,取200μL采用DNA提取随机抽取样本采用质控引物扩增后含SNP位
试剂盒(Qiagen)完成目标DNA提取,置入-80℃点产物直接测序基因型结果与SSP-PCR法检判定
冰箱待检。引物设计合成由英潍捷基公司完成,基因型相同,证实SSP-PCR法检测基因位点准确。

物,包含SNP位点质控正向引物和通用反向引物。支气管哮喘组rs2293152位点CC基因型比例
具体引物情况:rs2293152特异正向引物为高于体检健康组,差异有统计学意义(P<);
AACGCGCCTACTTCTTTCCTGCCC,特异反向引物为支气管哮喘组rs2293152C/G位点C等位基因比例
TAAGTTCCTCTCCTGGCTGTTCCG;rs957970特异正高于体检健康组,差异有统计学意义(P<);
向引物为CTTATGACATTCTCCAGGTTCATC;特异C等位基因儿童发生支气管哮喘风险为G等位基
^
反向引物为TCTCGTCACGTTTACAAGTAATGCT。(OR=,95%CI:~)。两组
-PCR反应和琼脂糖凝胶电泳采用rs957970位点基因型和等位基因比例比较,差异
25μL反应体系,、质控正无统计学意义(P>)。见表1。
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(%)
表1两组基因型和等位基因分布差异分析[n]
rsC/GrsC/T
2293152957970
组别n基因型等位基因基因型等位基因
CCCGGGCGCCCTTTCT
(.)(.)(.)(.)(.)(.)(.)(.)(.)(.)
体检健康组290268971444966120413819633793846621782690156537956193131253792684621
(.)(.)(.)(.)(.)(.)(.)(.)(.)(.)
支气管哮喘组260501923118453892353821841923025808622385144553854207726851542524846
........
χ2值641074166419037019026030
........
P值001042029004062084074056
注:等位基因总数为例数×2。
3讨论达水平可见显著提高。此外SSP-PCR法检测基因
多态性位点与直接测序法检测结果具有较高一致
支气管哮喘目前已成为全球性疾病,在发达
性,检测快速且价格相对低廉[2],故本研究采用
国家和发展中国家发病率均较高,同时发病率、
SSP-PCR法分析STAT3基因多态性与小儿支气管
致死致残率和病死率均呈逐年增高趋势;而小儿
哮喘间关系。
支气管哮喘患儿往往会对生长发育及身心健康产
本次研究采用SSP-PCR法检测本地区STAT3
生不利影响[6]。如何进一步探索明确支气管哮喘
基因,结果显示本地区STAT3基因rs2293152和
病因及发病机制以实现疾病早期预防对于改善儿
rs957970均存在SNP,其中rs2293152位点基因型
童生活质量及远期预后越来越受到医学界的关注。
分布频率与国外报道存在差异[15],笔者认为这可
喘息是学龄前儿童呼系统常见症状之一,根
能与纳入人群种族和地区差异有关。同时支气管
据病情进展情况可分为早期一过性喘息、早期持
哮喘组rs2293152位点CC基因型比例高于体检健
续性喘息及迟发性喘息或哮喘[7]。一般仅存在特
康组(P<);支气管哮喘组rs2293152C/G位点
应性因素的迟发性喘息患儿可进展形成支气管哮
C等位基因比例高于体检健康组(P<);C等
喘;对于此类患儿早期诊断早期干预理论上可降
位基因儿童发生支气管哮喘风险为G等位基因
低小儿支气管哮喘发病风险,但目前临床仍没有^
(OR=,95%CI:~),证实表
具有较高准确性和特异性预测指标[4]。支气管哮
明rs2293152C/G位点C等位基因可能与小儿支气
喘已被证实属于多基因遗传性疾病,直系亲属发
管哮喘发生有关,属于易感基因,故可针对此类
病比例可达35%~75%[8]。近年来探索支气管哮喘
人群可能早期干预。但两组rs957970位点基因型
致病基因等分子遗传学研究不断深入,候选基因
和等位基因比例比较,差异无统计学意义(P>
定位克隆是目前疾病易感基因主要遗传学分析方
),则说明rs957970位点SNP与小儿支气管哮
法,目前200个以上支气管哮喘发病候选基因已
喘发生无关。以上结果为明确小儿支气管哮喘致
被筛选,参与到机体炎性反应、免疫识别及细胞
病基因提供更为充足证据。
胞内信号转到等多种生物学活动,如人类白细胞①
Ⅱ本次研究亦存在一定不足:作为小样本单
抗原(HLAII)、肿瘤坏死因子α(TNFα)、Toll
中心回顾性报道,所得结论无法完全排除混杂因
样受体及白细胞介素(IL)等,基因型均与支气②
素影响;因临床资料不全无法进一步分析
管哮喘有关[9-10]。
rs2293152位点多态性与小儿支气管哮喘疾病严重
核转录因子STAT3可在人体内多种组织及细
程度相关性,而是否可影响STAT3基因表达及生
胞中表达,作为一种DNA结合蛋白,其在无功能
理功能仍需后续研究确证。
状态下被胞外信号激活,磷酸化后在细胞核内与
综上所述,本地区小儿支气管哮喘发病与
特异DN***段结合,进而调控相应基因转录表
STAT3基因rs2293152C/G位点有关,其中C等位
达,发挥调解细胞增殖分化、肿瘤发生及感染进
基因可能为常见易感基因。
展等多方面[11-12]。已有研究[13]显示,支气管哮喘
模型小鼠呼吸道上皮平滑肌细胞STAT3基因敲除参考文献
后,尘螨抗原激发呼吸道反应性显著下降,推测
[1]TIANCY,GAOFL,LIX,-
STAT3可能参与到支气管哮喘病情进展过程中。inducedairwayinflammationandremodelingviainactivationof
κ
另有报道[14]提示,支气管哮喘患儿血清STAT3表NF-BandSTAT3inanasthmamousemodel[J].ExpMolPathol,
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2020,113:-40.
[2]ZHAOL,SHIXL,WANGN,,targetedbymiR-375,[9]ERLICHTH,SHARKIAI,LANDOLINAN,
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κ
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κ
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