多巴胺预处理根管内壁对AH...plus糊剂粘接效果的影响 徐兆莹.pdf

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口腔疾病防治年月第卷第期
692JournalofPreventionandTreatmentforStomatologicalDiseases,,://
··
[DOI].2096⁃·基础研究·
多巴***预处理根管内壁对AH⁃plus糊剂粘接效果
的影响
徐兆莹,张雪,潘爽
150001
哈尔滨医科大学附属第一医院牙体牙髓病科,哈尔滨医科大学口腔医学院牙体牙髓病科,黑龙江哈尔滨()
AH⁃plus
【摘要】目的探讨用多巴***预处理根管内壁对提高糊剂与根管牙本质壁的粘接性能的效果。方
10°32ProTaper
法收集新鲜无龋坏、牙根无折裂、根管弯曲度<的单根管离体恒牙颗,均使用旋转镍钛器械
F2123mg/mL24h4=80mg/mL
预备至,分别使用、、多巴***溶液预处理根管并分为组(n):多巴***组(空白对
1mg/mL2mg/mL3mg/mL
照组)、多巴***组、多巴***组、多巴***组。用扫描电镜观察多巴***与根管牙本质壁的
AH⁃plusAH⁃plus
结合状况;激光共聚焦扫描显微镜观察糊剂渗透情况;以糊剂与牙胶尖用冷牙胶侧方加压技
1/31/31~2mm
术进行根管充填,在根中及根尖处切割根管,切片厚度,在万能试验机下进行根充物推出试
0mg/mL24h
验,比较各组间推出粘接强度。结果通过扫描电镜可以观察到对照组多巴***溶液处理后,牙
1mg/mL2
本质小管大部分呈现开放状态;组,根管内壁牙本质小管表面有少量多巴***颗粒分布疏松不均匀;
mg/mL3mg/mL
组,可观察到大部分牙本质小管被多巴***颗粒覆盖,且多巴***层均匀致密;组,牙本质小管管
AH⁃plus
口沉积大量多巴***颗粒,但不均匀分布。通过激光共聚焦扫描显微镜下可观察到多巴***和糊剂可以
AH⁃plus
同时渗入牙本质小管。解剖部位与多巴***浓度两因素交互作用对糊剂粘接强度无显著差异(P>
⁃
);根管经多巴***处理后,与糊剂粘接强度最高(P<);分析不同解剖部位的糊剂粘
⁃plus1/31/3
接强度结果有显著差异(P<);糊剂粘接强度在根中高于根尖。结论不同多巴***浓度处
AH⁃plus2mg/mL24hAH⁃plus
理根管内壁对糊剂粘接效果有影响,多巴***溶液处理后,糊剂与根管内牙本质
壁粘接效果较好。
AH⁃plus
【关键词】糊剂;多巴***;牙本质小管;粘接强度;微渗漏;根管充填质量
R78A2096⁃1456202210⁃0692⁃07
【中图分类号】【文献标志码】【文章编号】()
.AH⁃plus[J].微信公众号
【引用著录格式】徐兆莹,张雪,潘爽多巴***预处理根管内壁对糊剂粘接效果的影响口腔疾病
,2022,30(10):692⁃:.2096⁃.
防治
XUZhaoying,ZHANGXue,
EffectofdopaminepretreatmentonrootcanalbondingwithAH⁃plussealer
,theFirstAffiliatedHospitalofHarbinMedicalUniversity,Departmentof
Endodontics,SchoolofStomatology,HarbinMedicalUniversity,Harbin150001,China
Correspondingauthor:PANShuang,Email:******@,Tel:86⁃451⁃85553234
Toobservetheeffectofdopaminepretreatmentoftherootcanalonimprovingthebonding
【Abstract】Objective
performanceofAH⁃⁃
Methods
lected,withnocaries,nofractureofroots,andarootcanalcurvature10°.AllsamplerootcanalswerepreparedtoF2
<
withProTaperrotatingnickel⁃titaniuminstrumentsandthentreatedwith1mg/mL,2mg/mL,or3mg/mLdopaminesolu⁃
tionfor24hoursanddividedinto4groups(=8):0mg/mLdopaminegroup(blankcontrolgroup),1mg/mLdopamine
n
group,2mg/mLdopaminegroup,and3mg/
combinationofdopamineandrootcanaldentinwall;laserconfocalscanningmicroscopywasusedtoobservethepene⁃
trationofAH⁃plussealer;androotcanalfillingwasperformedwithAH⁃plussealerandgutta⁃perchatipusingthecold
2022⁃01⁃212022⁃03⁃16
【收稿日期】;【修回日期】
81570963SKLOD2021OF05
【基金项目】国家自然科学基金();国家重点实验室专项资助项目()
******@
【作者简介】徐兆莹,医师,硕士研究生,:
******@⁃451⁃85553234
【通信作者】潘爽,主任医师,博士后,:,:
2022103010
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JournalofPreventionandTreatmentforStomatologicalDiseases,,://
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gutta⁃
sectionsoftherootwithaslicethicknessof1⁃⁃outtestwascarriedoutunderanInstronuniversaltest⁃
ingmachinetocomparethepush⁃
Results
showedthatmostofthedentinaltubuleswereopeninthecontrolgroupafter0mg/mLdopaminesolutiontreatmentfor
,asmallnumberofdopamineparticlesonthesurfaceofthedentintubulesintheinner
,mostofthedentinaltubuleswerecov⁃
eredbydopamineparticles,,alargenumberof
dopamineparticlesweredepositedatthemouthofthedentinaltubules,
AH⁃plussealercanbeseentosimultaneouslyinfiltrateintodentinaltubulesunderaconfocallaserscanningmicro⁃
,theanatomicallocationanddopamineconcentration,hadnosignificanteffects
onthebondingstrengthofAH⁃plussealer().Rootcanalstreatedwith2mg/mLdopaminehadthehighestbond⁃
P>
ingstrengthinallgroups().Analysisofthepush⁃outtestofbondingstrengthwithAH⁃plussealeratdifferent
P<
anatomicallocationsshowedsignificantdifferences().Thepush⁃outbondingstrengthoftheAH⁃plussealerin
P<

Conclusion
dopamineconcentrationscouldaffectthebondingstrengthofAH⁃
dopaminefor24hours,thebondingeffectofAH⁃plussealerinrootcanalswasimproved.
AH⁃plussealer;dopamine;dentinaltubules;bondingstrength;microleakage;rootcanalfilling
【Keywords】
quality
JPrevTreatStomatolDis,2022,30(10):692⁃698.
Theauthorsdeclarenocompetinginterests.
【Competinginterests】
ThisstudywassupportedbythegrantsfromNationalNaturalScienceFoundationofChina()andSpecial
SupportProjectofStateKeyLaboratory().
10
根管治疗是治疗牙髓病和根尖周病最常用的成化学性粘接,从而抵抗水的冲击[]。研究者从
MFP
治疗方法,根管充填是根管治疗的终末关键环节,仿生角度出发,获得了一个与含有相同邻苯
1⁃2
充填质量不佳是治疗失败的常见原因之一[]。有二酚和氨基两种特征基团的白色晶体化合物——
研究表明根管充填质量对根尖周区健康的影响远多巴***。多巴***作为一种交联剂,其中的邻苯二
3
大于冠修复质量[],因此在临床上常通过应用不同酚结构可以增强与底物的结合。目前多巴***在口
根管冲洗液、冲洗方式来增强根充材料与根管内腔粘接、颌面部软组织损伤、口腔种植及成骨修复
壁的粘接性能,研究也证实该处理可改善环氧树等领域的粘附作用均有研究,其具有良好生物相
411
脂基封闭剂与根部牙本质间的抗脱落性能[],但无容性和粘接性能[]。目前临床上根管充填前常采
论是在冠修复体还是粘接的封闭材料中,树脂与用纸尖干燥,然而纸尖并不能使根管内牙本质小
牙本质间界面总是存在聚合收缩,并随着时间的管达到完全干燥状态,根管内残留的水分对不同
AH⁃plus
推移而产生微渗漏。研究表明根管糊剂树脂类根管糊剂粘接性可产生影响,有研究显示
5⁃6AH⁃plus
也存在聚合收缩的弊端[],它自身的疏水性使其根管糊剂在根管潮湿状态下粘接性较差,
AH⁃plus
在湿润环境中渗入牙本质小管的能力下降,无法为此需要寻找改善糊剂粘接性的新方法。
7⁃8
实现与牙本质的有效粘接[]。为了减少微渗漏,抵本实验利用多巴***对根管内壁进行预处理,引入
AH⁃plus
抗桩道预备时机械应力造成粘接界面破坏,提高树多巴***中邻苯二酚基团,并使其氨基与糊
AH⁃plus
脂类根管封闭剂的粘接性具有重要意义。剂中环氧基进行交联,探讨其提高糊剂的
AH⁃plus
贻贝是一种海洋贝壳类生物,它们的足丝可粘接性能、改善糊剂微渗漏的效果。
以在海底潮湿底物上强附着,可使贻贝承受波浪
91
的冲击力[]。这种独特的耐湿粘接性归因于贻贝材料和方法

分泌的一种特殊蛋白,即贻贝粘附蛋白(样本选择与收集
footproteinMFPL⁃3,4⁃
,),它含有高浓度二羟基苯丙经哈尔滨医科大学附属第一医院伦理委员会
2019JS16201935
氨酸,其邻苯二酚基团可以与水下的物体表面形审核通过[批号:(研)],经患者知
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3220~45X
情同意下,收集单根管离体恒牙颗(岁)。技术进行根管充填,线片检查充填质量,暂封膏
37℃
纳入标准:新鲜无龋坏,牙根及根尖孔发育完全,封闭根冠部,指甲油封闭根尖部。保存于、
100%10dAH⁃plus
未经根管治疗,牙根无折裂的单根管牙,根管弯曲湿度的电热恒温培养箱中使根
10°Schneider
度<(法)。管糊剂固化。

主要试剂与仪器使用低速切片机在距离根管样本根尖及
%NaClO17%EDTA6mm1~2mm
溶液、根管润滑液、处水平向切割根管,制备成厚度为
EDTAAH⁃
凝胶(朗力生物医药有限公司,中国);的根管切片。排除根管横截面形状为椭圆形样本
plusDentsplyDentsply/≥2
封闭剂(,美国);牙胶尖(,美(最长径最短径)、横断面存在明显气泡的
Tris⁃HClPHygege
国);缓冲液(公司,中国);多巴***样本。
Sigma⁃
(公司,美国);罗丹明(上海展云化实验观察指标

工有限公司,中国);荧光素钠(中科行,中国);低扫描电镜观察多巴***与根管牙本质壁的结
SYJ15025%50%75%
速切片机(,沈阳科晶公司,中国);万能材合状况将牙根纵剖面切片经、、及
AG⁃Xplus20min24h
料试验机(,岛津公司,日本);体视显微无水乙醇依次梯度脱水各,真空干燥,
LEICASEMSU500060s
镜(公司,德国);扫描电镜(,日喷金,采用扫描电镜,观察多巴***与根管牙本
LSM880Zeiss
立公司,日本);激光共聚焦显微镜(,,质壁的结合状况。
⁃plus
德国)。激光共聚焦扫描显微镜观察糊剂

样本制备及实验分组渗透情况所有切片表面使用目和目砂

离体牙根管预备使用低速切割机去除牙纸抛光。在激光共聚焦显微镜下分析对应根中部
#15K6mm
冠部,得到牙根。记录锉疏通根管至根尖孔(距根尖孔处)和根尖三分之一(距根尖孔

的长度,此时根尖孔处可见锉尖,该长度减去处)的切片。为了正确显示所有图像,观察多
mmProTaperImageJ
确定工作长度。机用镍钛系统根备至巴***在牙本质小管内的渗透情况,用软件
F230#%NaClOAH⁃plus
()。每更换一次器械均用和测量牙本质小管内荧光素钠标记的糊剂
17%EDTA10mLAH⁃plus
交替冲洗根管,预备完成后用蒸的渗透面积百分比。渗透面积指测量糊
1A2-
馏水作终末冲洗。剂沿根管壁的穿透面积(图),计算公式为:(
×100%A1A2AH⁃plus
多巴***溶液的配制及根管预处理分组);:根管壁面积;:糊剂沿

多巴***加入值为、的根管壁的穿透面积;:牙根的总面积。
⁃HCl3mg/
缓冲液配成多巴***溶液,再分别加入万能试验机粘接强度推出实验将实验切片
40mL10mLTris⁃HCl1mg/
和缓冲液分别稀释至就位后使用尖端直径为、、
mL2mg/mLB6mm3mm
、。加入罗丹明荧光染料,使其终浓的工作加载头,匹配根中、根尖两个部

度为,避光保存。将离体牙浸泡在配制
24h
好的不同浓度多巴***溶液中,室温下避光保存
25
取出,取出样品用蒸馏水超声清洗次,每次
min
,自然干燥以去除没有结合的多巴***。将得到T
480mg/mL
的样本分为组,每组颗:多巴***组A2
1mg/mL2mg/mLA1
(空白对照组)、多巴***组、多巴
3mg/mL2
***组、多巴***组。干燥后随机每组抽取
个牙根,沿冠根方向纵向劈开根管,显露根管内壁
后用激光共聚焦显微镜观察根管内壁纵剖面多巴
3kV2000T:totalrootslicearea;A2:thetotalpenetrationareaofAH⁃plus
***沉积情况。采用扫描电镜,在、倍条
sealer;A1:rootcanalwallarea
件下观察牙根纵剖面多巴***在根管牙本质内壁的Figure1Confocallaserscanningmicroscopicimagesof
沉积。剩余样本用纸尖蘸干根管,直到最后一个AH⁃plussealerpenetrationinrootcanals(×10)
纸尖干燥为止,进行根管充填。1AH⁃plus
%AH⁃图激光共聚焦显微镜下糊剂渗透情况
根管充填荧光素钠染料与×10
plus11000()
糊剂以质量比:混合。冷牙胶侧方加压
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位的根充物直径(工作加载头的直径最大范围接根管牙本质表面沉积物形貌分析
0mg/mL
触充填物并避免碰触根管侧壁),从根尖方至根冠通过扫描电镜可以观察到对照组多

方垂直向持续加压,加载速度为。加载巴***溶液处理后,牙本质小管大部分呈现开
1mg/mL
头的尖端置于切片根充物的上方,保证其在加压放状态,有少量碎屑残留;经多巴***溶液
24h1/31/3
过程中只与牙胶接触。处理后,根中和根尖处根管内壁牙本
推出力和粘接力是一对相互作用力,根据公质小管表面有少量多巴***颗粒分布疏松不均匀;
=/2mg/mL24h
式计算出粘接强度:粘接强度粘接力粘接面积,当在的多巴***溶液中处理,可观察到
P=F/SPF
即。为粘接强度,为粘接力(充填物完全大部分牙本质小管被多巴***颗粒覆盖,且多巴***
S3mg/mL
脱离根管壁时的推出力),为粘接面积。粘接面层均匀致密;当牙根经多巴***溶液处理
SS=πR+r-r∧2+h2R
积的计算公式如下:()(R)。∧后,牙本质小管管口沉积大量多巴***颗粒,但不均
rh2
表示充填物冠方半径,表示充填物根方半径,表匀分布(图)。
示样本厚度。通过激光共聚焦扫描显微镜下可观察到纵剖

统计学分析面根管内壁多巴***(图)。多巴***在根管牙本质

小管内沉积,并且覆盖大部分牙本质小管管口(图
采用及软件对渗3b3c
)。图为根管横断面牙本质小管内多巴***和
透面积百分比和粘接强度进行统计分析及绘图,AH⁃plusAH⁃plus
研究数据不符合正态分布时,采用秩和检验进行糊剂合成图,显示了多巴***和糊
Mann⁃Whitney
统计学分析,两组测定结果采用秩剂可以同时渗入牙本质小管。
Kruskal⁃
和检验进行比较,多组测定结果采用渗透面积百分比结果
=⁃plus
H秩和检验进行比较,双侧检验水准ɑ。研究不同解剖部位的糊剂渗透面积百分
=
数据符合正态分布时,采用方差分析进行多组比比有显著性差异(F,P<);其中根中
=
较,双侧检验水准ɑ。当方差齐时,进一步两处渗透面积百分比均值大于根尖;多巴***浓
LSD
两比较采用法,方差不齐时,两两比较采用度及浓度解剖部位两者之间的交互作用差异无统
=
法,当P<,表示差异具有统计学意义。计学意义(F,P>),见图。

结果粘接强度结果分析
Theapicalthird
Themiddlethird
Dopamine0mg/mL(×1000)1mg/mL(×2000)2mg/mL(×2000)3mg/mL(×2000)
Thegroupwastreatedwith0mg/mLdopaminesolutionfor24h,mostofthedentinaltubulesareopen,withasmallamountofdebrisremaining(×
1000).Asmallamountofdopamineparticlesonthesurfaceofthedentintubulesintheinnerwalloftherootcanal,andthedistributionofdopa⁃
mineparticlesislooseanduneven(×2000).2mg/mLdopaminesolutionfor24h,itwasobservedthatmostofthedentinaltubuleswerecovered
bydopamineparticles,andthedopaminelayerwasuniformanddense(×2000).Therootwastreatedwith3mg/mLdopaminesolution,alarge
numberofdopamineparticlesweredepositedatthemouthofthedentinaltubule,butthedistributionwasuneven(×2000)
Figure2Theattachmentofdopaminetothedentinwallofrootcanal24haftertreatmentwithdifferentconcentrationsof
dopaminesolutionwasobservedbyscanningelectronmicroscope
224h
图扫描电镜观察不同浓度多巴***溶液处理后根管牙本质壁多巴***附着情况
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696JournalofPreventionandTreatmentforStomatologicalDiseases,,://
··
a:thedentinaltubulesinlon⁃
gitudinalview,dopamineen⁃
teredinrootcanaldentintu⁃
bules(redfluorescence),bar=
100μm;b:thedentinaltu⁃
bulesinthecross⁃sectional
view,dopaminecoveredthe
dentinaltubules(redfluores⁃
abccence),bar=20μm;c:cross
section,dopamineinthedentinaltubules(redfluorescence)andthepenetrationofAH⁃plussealerinthedentinaltubules(greenfluorescence),it
wasshownthatdopamineandAH⁃plussealercanpenetrateintodentinaltubulessimultaneously,bar=200μm
Figure3TheimageofthelaserconfocalscanningmicroscopepenetrationofAH⁃plussealer
pretreatedwithdopamineinthedentintubules
3AH⁃plus
图激光共聚焦扫描显微镜下经多巴***预处理后糊剂在牙本质小管的渗透情况
*
80*
Dopamine25Dopamine
0mg/mL0mg/mL
60ab
1mg/mL201mg/mL
)2mg/mL
%
(2mg/mL15
40c3mg/mL
3mg/mLad
10cce
20a
5bc
strength/MPa
penetration
0bondingPush⁃out0
TheapicalthirdThemiddlethird
hecnaeosealerofpercentageTheTheapicalthirdThemiddlethird
*:
P<Differentlettersmeantherewasastatisticaldifferencebetween
Figure4PercentageofpenetrationareaofAH⁃plusgroups,*:
P<
sealerindentintubulesFigure5BondingstrengthofAH⁃plussealerpretreated
4AH⁃pluswithdifferentconcentrationsofdopamineatdifferent
图糊剂在牙本质小管内渗透面积百分比
anatomicalparts
5
图不同解剖部位经不同浓度多巴***预处理后的
不同解剖部位的糊剂粘接强度差异具有统计AH⁃plus
=
学意义(Z,P<)。根中组糊剂粘接
1/31/30mg/mL
强度明显高于根尖组;在根尖组中,具有粘接性的界面,促进化学性结合。
1mg/mL=
组与组(Z,P<)、组扫描电镜形貌分析
=
(Z,P<)间差异具有统计学意义,本实验使用不同浓度多巴***对根管内壁预处
3mg/mL2mg/mL=
组与组差异具有统计学意义(Z理,通过扫描电镜可以看到随着多巴***浓度的升

,P<)。在根中组中,组与高,其附着在牙本质小管表面的形貌由疏松逐渐
2mg/mL0mg/mL2mg/2mg/mL
组具有显著性差异,组与形成均匀致密的涂层,其中多巴***涂层更
mL1/3
组具有显著性差异。无论根尖组还是根中为均匀致密,这是多巴***氧化聚合后形成聚多巴
1/32mg/
组,浓度为粘接强度最大(P<),***的薄膜层;而多巴***尚未形成连续的薄
5
见图。膜层,有研究表明多巴***自发氧化聚合沉积过程
24h
时间较久,需才能形成一定厚度的、较稳定的
313
讨论聚多巴***薄膜[],因此本研究将样本处理时间选
24h
本研究利用多巴***预处理根管内壁后