第5章 核酸类--脂类药物课件.ppt

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第一节概述
核酸是以核苷酸为基本组成单位的生物大分子,携带和传递遗传信息。
98%分布于细胞核,其余分布于核外如线粒体,叶绿体。
主要分布于细胞质(90%),剩余10%位于细胞核。
(deoxyribonucleicacid,DNA)
(ribonucleicacid,RNA)
脱氧核糖核酸
核糖核酸
携带遗传信息,决定细胞和个体的基因型(genotype)。
参与细胞内DNA遗传信息的表达。某些病毒RNA也可作为遗传信息的载体。
核酸
碱基
戊糖
核苷
磷酸
核苷酸
一、RNA的制备
(一)材料的选择与预处理
制备RNA的材料要选择含核酸量丰富的组织。
RNA的含量和细胞的活跃程度有关,在蛋白质合成旺盛的细胞中,其RNA的含量也相应地较高。
第二节核酸类药物的一般制备方法
组织匀浆
沉淀物(DNA、蛋白质等)
上清液(RNA等)
残留物(DNA等)
酸提取液(RNA)
碱处理
酸处理
残留物
脂溶性物质
有机溶剂处理
残留物
酸溶性小分子
冷酸处理

将经酸和有机溶剂处理后的残留物用1mol/L的过***酸液于4℃下处理18h,从中抽提出RNA,***酸液70℃下处理20min提取DNA。
此法的缺点是有些材料的DNA在冷过***酸抽提时被少量提取,从而使RNA部分中混有少量的DNA。

将残留物用1mol/L的NaOH溶液于37℃处理过夜,则RNA被碱解为碱溶性核苷酸,DNA不溶解。加入过***酸或三***乙酸使溶液酸化,至酸浓度为5%-10%,此时,RNA的分解产物溶解在上清液中,DNA等则被沉淀下来。此法的优点是RNA和DNA分开得较为彻底,缺点是RNA中还含有其他含磷化合物,如磷肽,磷酸肌醇等。
(二)提取与纯化

(1)乙醇沉淀法
(2)去污剂处理法
(3)酚法

(1)密度梯度离心法
(2)柱色谱法
(3)凝胶电泳法

RNA中的戊核糖可在盐酸的水解作用下游离出来,进一步形成糠醛,然后与地衣酚反应,反应物程鲜绿色,在670nm有最大吸收峰。
三、核苷酸、核苷及碱基的制备
(一)制备方法


(1)酶水解法
(2)碱水解法
(3)酸水解法



ATP的药理作用与临床应用
在生物体内,ATP广泛参与各种生化过程,除参与核酸形成外,主要起着供应能量和磷酸基团的作用。
ATP除了作为危重病人抢救的辅助药物外,还可对慢性肝炎、肝硬化、肾炎、心肌炎、冠状动脉硬化、进行性肌肉萎缩、再生障碍性贫血、脑血管意外后遗症、中心性血管痉挛性视网膜脉络膜炎、风湿性关节炎、耳聋、耳鸣等有一定疗效。