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1937年,White和Went等分别发现B族维生素和吲哚乙酸(IAA)对培养的离体根生长具有重要作用。1937-1938年,Gautheret在1934年培养山毛柳、黑杨成功获得愈伤组织的基础上,在培养柳树的培养基中,加入IAA和B族维生素等,使形成层的生长大为增加。1937-1938年,Nobecourt培养胡萝卜根和马铃薯的块茎薄壁组织,获得愈伤组织。将愈伤组织置于琼脂培养基上继续培养,可无限发生细胞增殖,形成愈伤组织。首次从液泡化的薄壁细胞建立愈伤组织培养物。
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White、Gautheret、Nobecourt等科学家被誉为植物组织培养的奠基人。在此基础上建立了植物组织培养的综合培养基,包括无机盐成分、有机成分和生长刺激因素。这是随后创立的各种培养基的基础,同时也建立了植物组织培养的基本方法,成为当今各种植物组织培养的技术基础。
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40年代末开始,进行从脱分化细胞组织培养进入探讨器官再分化的研究。 脱分化
细胞(组织、器官)—→再分化愈伤组织不定芽—→植株不定根
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1958年,Steward和Shantz以胡萝卜根的悬浮细胞诱导分化成完整的小植株,首次获得植株再生成功。1960年,Cocking等用真菌纤维素分离植物原生质体获得成功。1971年,Takebe等从烟草原生质体得到再生植株,首次获得原生质体植株再生成功。1972年,Carlson等通过两个烟草物种之间原生质体的融合,获得了第一个体细胞杂种植株。到目前为止,组织培养、原生质体培养、细胞融合已在许多植物上获得再生成功。
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三、植物细胞工程的应用
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(一)、脱毒和快速繁殖许多植物,特别是无性繁殖植物,带有病毒,并直接传给子代,严重影响产量和质量。一般茎尖生长点不带病毒。所以,利用茎尖培养再生的植株,可能不带病毒,再进行大量繁殖生产脱毒苗。脱毒苗用于生产可明显提高产量、质量和商品价值。目前已在许多植物上得到应用,如甘薯、马铃薯、草莓、果树、花卉等。
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许多名贵植物,之所以名贵,是因为繁殖系数太低,种子结实率低或者不结种子,而营养繁殖又很慢。利用组织培养再生植株,进行大量繁殖,可以大大提高繁殖系数。目前组织培养快速繁殖已在许多植物上应用,最早是兰花(60年代)。
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(二)、细胞工程育种1. 利用培养变异,筛选优良突变体。植物离体培养,能够明显提高突变率,并且会有各种各样的生理和形态突变,如株高、花色、植株形态、生育期、耐性等等。可以从中选择优良突变体,培育新品种。
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