蛇足石杉孢子离体繁殖技术研究 毛晓怡.pdf

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蛇足石杉孢子离体繁殖技术研究
毛晓怡,杨鑫,刘锐,建德锋*
(吉林农业科技学院吉林,吉林132101)
【摘要】蛇足石杉是一种古老的蕨类植物,具有非常重要的药用价值,该试验以蛇足石杉的孢子为外植体进行离体繁
殖以提高繁育速度,通过孢子不同接种方式及不同初代、增殖、生根培养基配方比较,最后得出,接种时最佳的接种方
式是将1cm大小的孢子叶直接接到培养基上;初代诱导阶段选用MS+6-+;增值
阶段选用MS+++;生根阶段选用1/2MS+
方效果最好。希望该试验的结论能为整个蛇足石杉快繁提供依据,加速其工厂化育苗。
【关键词】蛇足石杉;接种方式;培养基;快速繁殖
中图分类号::A文章编号:2096-1073(2022)06-0019-21
DOI:.
InVitroPropagationofConidiaofHuperiaSerbiflora
MAOXiaoyi,YANGXin,LIURui,JIANDefeng*
(JilinAgriculturalScienceandTechnologyCollegeJilin,Jilin132101)
Huperziaserrataisanancientferns,hasveryimportantmedicinalvalue,theexperimentwithhuperziaserrata
[Abstract]
sporesforexplantinvitropropagationinordertoimprovethebreedingspeed,throughsporesatthebeginningofdifferentinoc⁃
ulationmethodsanddifferentgeneration,proliferation,rootingmediumformulacomparison,finallyitisconcludedthat,when
thebestinoculatedwayistothesizeof1cmsporophylldirectlytotheculturemedium;MS+6-+
,MS+++⁃
+⁃
sionofthisexperimentcanprovidethebasisfortherapidpropagationofthewholehuperiaserrataandaccelerateitsfactory
seedling.
huperziaserrata;inoculationmethod;culturemedium;rapidpropagation
[Keywords]
蛇足石杉(Huperziaserrata()Trev.),式进行接种,分别为:
又名蛇足石松,为石杉科中的一种多年生草本植物,该植养基上;;
物为阴生蕨类植物,全草均可入药,入药具有消肿止痛、囊分离后,放在小块滤纸上(2cm大小),压碎取出孢子,连
止血散瘀、清热除湿等功效,还可以治跌打损伤、内伤吐同滤纸一起接种。
血、烫火伤等症。
益增大,野生资源又极其匮乏,而人工繁殖起来又很不易,培养基均以MS作为基本培养基,添加糖30g/L,琼脂
导致市场上蛇足石杉药材稀缺。为此,加速蛇石足杉苗7g/L。具体各个阶段的配方见表1。
木的培育非常关键,为给其快速繁殖提供参考依据,该试2结果和分析
验以蛇足石杉的孢子为原材料,研究其离体繁殖技术。
1材料和方法外植体以3种不同放置方式接种到6种培养基上,每
,每种培养基接30瓶,每种方式180瓶,共
试验于2020年6月份开始进行,2021年3月份结束,接540瓶。接种后统计成活数量、污染数量、出现愈伤组
试验于吉林农业科技学院北校区组培实验室进行。织数量,计算出愈率;后期统计不定芽出现时间、芽成活
,计算萌发率,具体如表2。由表2可以得出,3种接
从野外采挖蛇足石杉植株,带土栽植入花盆中,放入种方式污染瓶数都比较多,这是因为初次接种外植体来
室内进行重点养护。接种前采集母株上的孢子叶,在自于室外;3种接种方式都能产生愈伤组织,但A1萌发成
%的升***(HgCL2)溶液中浸泡3min,再用无菌水冲洗活瓶数及萌发率显著高于A2和A3。
4-5次,沥干水分,带入接种室中,
收稿日期:2021-12-22
基金项目:吉林省大学生科技创新项目(吉农院合字[2020]第064号)。
作者简介:毛晓怡,女,在读本科,研究方向:中草药栽培与鉴定。
*通讯作者:建德锋,男,硕士,副教授,研究方向:植物组织培养及大学生创新创业。
20现代农业研究
ModernAgricultureResearch第28卷
表1各阶段培养基配方
初代培养配方增殖培养配方生根培养配方
B1MS+6-+++
B2MS+6-++++
B3MS+6-++++
B4MS+6-++++
B5MS+6-+++
B6MS+6-+++
C7MS++
注:配方中各激素添加的单位均为mg/L。
表2外植体3种处理方法萌发情况
外植体处理接种瓶数污染瓶数出现愈伤组织的瓶数出愈率(%)芽萌发成活瓶数萌发率(%)
A11801057510051a68a
A2180111691008b12b
A3180108741003b3b
注:出愈率=出现愈伤组织的瓶数/接种的瓶数-污染的瓶;萌发率=芽萌发成活瓶的数/接种的瓶数-污染的瓶数;表中小写字
,下表类同。
表3不同诱导培养基对诱导萌芽的影响
培养基接种瓶数污染瓶数成活瓶数芽萌发瓶数萌发率(%)






表4不同增殖培养基上增殖情况
配方转瓶瓶数(/瓶)增殖倍数平均苗高(/cm)玻璃化瓶数(/瓶)玻璃化比率(/%)







毛晓怡,杨鑫,刘锐等:蛇足石杉孢子离体繁殖技术研究21
表5不同生根培养基中生根情况
配方转瓶瓶数(/瓶)生根率(/%)平均根数根形态
,根粗壮
,根粗壮
,根细弱
,仅少量根系
在6种不同诱导培养基上用A1的接种方式进行接3结论与讨论
种,每瓶培养基接1块外植体,共接300瓶,观察愈伤组织诱导阶段得出A1为最佳接种方式。采用A1这种接
形成芽的情况,计算芽萌发率,见表3。由表3可知,成活种方式进行接种,观察在不同诱导培养基中的茎段的诱
瓶中外植体也都诱导出了愈伤组织,这就说明配方中6-BA和导分化情况,从而得出最佳的初代培养基配方为MS+6-
NAA的选择是正确的,一段时间后,+,最佳的增殖培养基配方为
芽,但各自的萌发状况不同,这说明激素的浓度对诱导萌MS+++,最佳的生
发有影响,但B3、B4这两种培养基配方的萌发率较高,根培养基配方为1/2MS+。6-BA和NAA为
B5、B6、B2、B1相对较低,综合比较得出MS+6-,主要作用是诱导细
L+。胞分裂和根的分化,这两种激素一起使用可以诱导蛇足
,但是它们的作用浓度有一定
待诱导阶段萌发出的不定芽长成3-4cm高时,将其的范围,浓度超过这个范围就会产生抑制作用,所以该试
切成1-2cm小段转接到7种不同增殖培养基配方中,各验诱导阶段选用浓度配方MS+6-+
小段开始生长,转瓶28d统计各瓶中苗木的增殖状况,具mg/L具有一定的实践意义。
体结果见表4。由表4可以看出,C6增值倍数最大,C5平
均苗高最大;从C1-C6玻璃化的比率一直处于上升状态,参考文献:
说明NAA添加容易导致玻璃化。经查阅资料显示,在培[1]龙华,李菁,李鹂,[J].中药
材,2014,(7):58-62.
,可以减少玻璃化现象。因此
[2]梁一池,[J].福建林学院
在第2次继代时,选择在C5、,发
现C5配方添加后已无玻璃化现象发生,而C6配方仍有玻学报,2002,(1):93-96.
[3]马英姿,刘江海,许欢,[J].植物生理
璃化存在。最终得出C5+
学报,2015,(4):102-106.
养基配方。
[4]胡彦,

在的问题[J].陕西师范大学学报(自然科学版),2004,(S1):
表5是不同生根培养基配方中生根情况的数据。由
130-134.
表5可以看出,D1和D2的生根率最高,并且达到了
[5]蔡柯,贾昊,姜茹桐,[J].
100%,而D3与D4的生根率只有72%和23%。通过比较
现代农业技术,2018,(5):55-58.
D1和D2的其他因素,综合得出D2更适合蛇足石杉生根(责任编辑:李丹)
生长。