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实用心脑肺血管病杂志年月第卷第期·
· 论著
大鼠全脑缺血再灌注后脑红蛋白的表达
张兴毅,陈长林,李慧仙
【摘要】目的探讨大鼠全脑缺血/再灌注损伤后大脑皮质及海马回中脑红蛋白的演变。方法将
只标准健康大鼠随机分为对照组只与实验组只。实验组采用四血管阻塞法建立大鼠全脑缺再灌注损
伤的模型。用免疫组织化学法,原位杂交法检测大鼠皮质及海马区的表达,测量其光密度值,用苏木素一
伊红染色检测存活锥体细胞数。结果两组大鼠大脑海马区及表达在、、时与对照组比较,
差异均有统计学意义.;实验组大鼠大脑皮质及光密度在缺血再灌注后较对照组无明显
变化.,灌注后达高峰,与、、、比较差异均有统计学意义.;实验组大脑海马区存
活锥体细胞数随再灌注时间的延长而减少,各时问点两组比较差异均有统计学意义.。结论大鼠全脑缺血
/再灌注后,表达上调参与了脑神经元的保护。
【关键词脑缺/再灌注损伤;脑红蛋白;原位杂交
【中图分类号】. 【文献标识码】【文章编号】———
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脑血管病是严重危害人类健康的疾病,而缺血性脑血管病. 对象选择遵义医学院珠海校区实验动物中心提供的健
的发病率约占脑血管病的% ~%。脑缺血再灌注后的作康标准大鼠只为研究对象,体质量~。
用呈双向性,既可挽救濒临死亡的细胞,又可加重缺血细胞的. 方法
损伤,甚至导致细胞的死亡,因此称为缺血再灌注损伤。脑红.. 分组将大鼠随机分为两组:对照组只与实验
蛋白是一类类似肌红蛋白的携氧球蛋白,能增加组组只。每组按再灌注的时间又分为、、、和
织的抗缺氧损伤,提高神经元的存活率。脑缺血再灌注后不同共个观察时间点,每个时间点只大鼠。
脑组织中表达量的差异决定了组织细胞的功能状态。本.. 模型制作用% 异戊巴比妥钠按/麻醉大
实验通过对不同时间点以及不同部位及的检鼠,止血钳夹脚趾无明显反应时开始手术,阻断双侧椎动脉;
测来说明的神经元保护作用。后分离双侧颈总动脉用无损伤动脉夹夹闭双侧颈总动脉,
对象和方法大鼠的角膜反射、翻正反射消失、眼球~即变灰、毛发可
竖起,后撤去无损伤动脉夹造成再灌注;对照组只暴露
基金项目:珠海市科学技术局资助项目;珠海市卫生局基金课横突孔,不阻塞椎动脉;只分离颈总动脉,不夹闭。两组老鼠
题;贵州省科学技术厅基金
分别在、、、、断头取脑放入% 的多聚甲醛液中
作者单位:广东省珠海市,遵义医学院第五附属珠海医院
固定。实验中有翻正反射、一直抽搐、能吸水者、眼球不变灰
· · ,, .
者弃之。表两组大鼠皮质表达的光密度比较±
. 观察项目及检查方法
.. 兔抗大鼠多克隆抗体浓缩型武汉博士德提
供,采用免疫组织化学法进行检测;按其说明书进行
操作。表达的阳性细胞为胞浆内光镜下见有棕黄色物质。注: 与对照组比较,.
原位杂交试剂盒上海和乐生物科技有限公司提讨论
供;原位杂交专用缓冲液武汉博士德;缓冲液脑缺血再灌注后引起能量衰竭和酸中毒,产生大量的自由
武汉博士德提供;缓冲液武汉博士德提供,表基、兴奋性氨基酸,磷脂代谢异常积聚,并引起离子自稳