凝血酶对骨髓来源内皮祖细胞增殖能力的影响.pdf.pdf

海南医学院学报,

凝血酶对骨髓来源内皮祖细胞增殖能力的影响
陈思思,江洪,陈静,杨简,何勃
武汉大学人民医院心内科、武汉大学心血管病研究所,湖北武汉
摘要目的:观察凝血酶对骨髓来源内皮祖细胞增殖能力的影响并探讨其机制。方法:密度梯
度离心法从大鼠骨髓分离,培养后收集贴壁细胞并加入不同浓度凝血酶~ ,。,,,
/干预一定时间,,,。一试剂盒检测增殖。实时定量检测凝血
酶刺激以及—抑制剂预处理以后的表达变化, 法检测其分泌量变化。
结果:凝血酶干预组的细胞增殖数均高于对照组,/凝血酶作用对内皮祖细胞数量影响最
为显著.。与对照组相比,凝血酶刺激后表达及分泌量均增高,使用—抑
制剂预处理后可以抑制凝血酶的这种作用。结论:凝血酶可以通过—途径上调的表达,
促进增殖。
关键词内皮祖细胞;细胞增殖;凝血酶;骨髓
中图分类号;~ 文献标识码文章编号———
—
—, , , ,
.’;.,—
, ,
,:,,
:—一,,,,—

””:一,,,,—
,:—
. .
:——:——, ,;:
:,.
:——
. :

. ,
, ,,,/
,,,. 一.
—
.
. :

, /
收稿日期—修回日期——
基金项目国家自然科学基金
作者简介陈思思’·女,湖北武汉人,博士研究生,:,:
. . .。
通讯作者江洪一,男,教授,博士生导师,主要从事心脏介入和临床电生理方面的研究
, : . 。
—
海南医学院学报...
.. —
,. :

.
;;;
内皮祖细胞是来源于骨髓,存在于外周胞上清液,×离心去除颗粒和聚合
血的,具有,以及血管内皮细胞生成因物,根据试剂盒说明书加入试剂,自动酶标
子受体的内皮前体细胞。除了参仪上以波长测定光密度值。
与血管内皮损害后的修复过程,还参与晚期周围血. 实时定量检测水平
管病及心肌梗死后缺血血管的再生。凝血酶是一采用—法检测对照组、凝血酶干
种潜在的有丝分裂原,参与多种疾病的病理生理过预组/,、抑制剂预处理组的
程。有研究表明,凝血酶除了参与炎症应答外,在血的表达。收集贴壁细胞,用提
管新生中也起到重要作用嘲。目前,凝血酶促进血取总,紫外分光光度法测定其含量与纯
管新生的机制还有待研究,其可能是通过对内皮祖度,逆转录。以为内参对照,进行
细胞作用而实现的,本研究旨在观察不同浓度凝血扩增。引物:上游
酶在不同作用时间下对内皮祖细胞增殖能力的影下游
响,并讨论其可能的机制。反应体系:℃,;℃,;
材料与方法扩增个循环℃,; ℃,;℃,
. 材料与试剂;℃,。每份样品重复测定次。
鼠淋巴细胞分离液购自达科为生物有限公司; . 统计学处理
一完全培养基购自公司;,数据以
荆豆凝集素购自公司,一乙酰化低密度脂±表示,进行检验及方差分析,以
蛋白—购自公司;。
剂及一试剂盒购自碧云天公司;—二氧结果
化碳培养箱购自华粤行仪器有限公司;水平离心机. 凝血酶对增殖能力的影响
一购自上海安亭科学仪器厂。一检测结果表示,凝血