大学动物植物细胞工程 植物细胞工程.doc

大学动物植物细胞工程+植物细胞工程
复****动物植物细胞工程
一. 学****内容:
本周复****细胞工程,掌握动物细胞工程、植物细胞工程的操作过程。植物组织培养是植物细胞工程的基础,植物细胞的全能性是植物组织培养的理论基础。掌握动物细胞培养,单克隆抗体的制备,知道动物细胞在培养过程中的基本操作及其特点,单克隆抗体的概念,以及利用杂交瘤细胞制备单克隆抗体的基本原理。
二. 学****重点:
1. 植物细胞工程的主要技术——植物组织培养、植物体细胞杂交
2. 动物细胞培养与植物细胞培养的比较
3. 单克隆抗体制备及其原理和应用
三. 学****难点:
1. 细胞全能性在细胞培养中的表现
2. 细胞杂交的原理
3. 动物细胞培养与单克隆抗体
四. 学****过程:
(一)细胞工程:
(二)植物细胞工程
1. 细胞全能性
概念:生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能
原因:每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质,都有发育成为完整个体所必需的全部基因
外延:每一个活细胞都因该具有全能性。受精卵的全能性最高。生殖细胞分化程度很高,但仍然具有全能性——孤雌生殖。体细胞的全能性比生殖细胞的全能性低的多。生物体内细胞并没有表现出全能性,而是表现出基因的选择性表达
表现:孤雌生殖:有一个卵细胞分化形成各种类型细胞,如:雄蜂、雄蚁
离体组织:外界条件(营养、激素、其他条件)适宜形成小植株,表现出全能性 2. 植物组织培养(1)培养基:
脱分化:高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程再分化:愈伤组织继续培养,重新分化成根或芽等器官的过程愈伤组织:排列疏松、无规则,高度液泡化的无定型状态的薄壁细胞激素使用:
①能强烈刺激愈伤组织的形成(细胞分裂素、生长素共同使用) ②影响再分化过程中根和芽的发生
?高:有利于芽的发生
?细胞分裂素、生长素浓度比?低:有利于根的发生
应用:
<1> 快速繁殖、培育无病毒植株
<2> 细胞培养生产药物、食品添加剂、香料、色素、杀虫剂(发酵罐中诱导分离的愈伤组织)
<3> 人工种子:胚状体+ 人工种皮
<4> 转基因植物的培育
3. 3. 植物体细胞杂交
概念:
(1)来自两个不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞(植物细胞融合)
(2)把杂种细胞培育成植株(植物组织培养)
过程:
4.
(三)动物细胞工程:
A. 动物细胞培养
1. 培养基:
状态液体培养液动物细胞生活的液体环境
成分葡萄糖满足能量需求、作为细胞碳源
氨基酸合成蛋白质
无机盐重要的细胞组成物质
维生素、动物血清等生长调节作用
条件恒温动物细胞生长温度
无菌条件防止微生物污染
2. 2. 过程:
幼龄动物组织→剪碎组织→胰蛋白酶处理→细胞培养(培养瓶)
3. 概念:
原代培养:将动物组织用胰蛋白酶处理成单个细胞,配制成一定浓度的悬浮液,放入培养瓶中在培养箱中培养的过程
传代培养:培养瓶中的细胞越来越多,用胰蛋白酶处理使细胞从瓶壁上脱离下来,配制成悬浮液,分瓶培养的过程
细胞株:原代培养细胞传至10代左右就不容易传下去,细胞生长停滞,大部分细胞衰老