基础微生物实验板书资料.pptx

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(1)了解普通光学显微镜的构造、学会显微镜使用和维护方法;
(2)掌握细菌涂片技术、革兰染色方法及其原理;
(3)熟悉细菌基本形态。
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(一)普通光学显微镜的构造 分光学和机械两大部分。光学部分包括接目镜、接物镜、集光器、光源等;机械部分有镜筒、镜臂、镜座、旋转器、载物台、光圈、倾斜关节、调节螺旋、次台等。
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(二)油镜使用的基本原理
油镜头的晶片细小,进入镜中的光亮亦较少,其视野较用高倍镜时暗。当油镜和标本间介质为空气时,因空气与玻璃的折射率不同,会有一部分光线被折射而不能进入油镜内,使视野更暗,若在镜头与标本之间放上与玻璃的折射率相同的油类,如香柏油等,则光线不发生折射,从而增加视野的照明度。
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(三)显微镜的使用方法
 
2、低倍镜观察 
3、高倍镜观察 
4、油镜观察 
5、用低倍镜和高倍镜观察酵母标本片,油镜观察球菌、杆菌、螺旋菌的染色标本片。
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(四)简单染色法与革兰氏染色法
(1)观察细菌的基本步骤:先用低倍镜再用高倍镜
(2)革兰氏染色法操作:
涂片→干燥→固定→草酸铵结晶紫出染(1min)→水洗→碘液媒染(1min)→水洗→95%乙醇脱色(30s)→水洗→沙黄复染(1min)→水洗→滤纸吸干→油镜检查

(1)细菌制片时不宜涂厚。
(2)严格保证脱色和染色时间。
(3)使用显微镜注意保护镜头。
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思考题
1、绘出你所观察到的细菌形态图。
2、观察细菌时为何使用油镜?它与普通物镜在使用方法上有何不同?
3、光学显微镜的目镜与物镜的常用放大倍数?显微镜的放大倍数越高,分辨力越高吗?为什么?举例说明。
1、绘出你所做的革兰氏染色制片中细菌的形态图,并标明总放大倍数及染色反应结果。
2、详叙革兰氏染色的原理及操作方法,染色时应注意哪些问题?
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实验二培养基的制备
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(1)掌握一般培养制备原理及原则,并学会配制一般普通培养基操作过程;
(2)学****微生物实验室常用灭菌设备的使用方法;
(3)学****玻璃器皿的包扎方法。

(1)液体培养基的制备
(2)固体培养基的制备
(3)微生物实验室常用灭菌设备的使用方法和灭菌方法
(4)玻璃器皿的包扎方法
(5)棉塞的制作方法
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1配料→温水溶解→校正pH值→煮沸→加琼脂融化→过滤→分装→加盖棉塞→包扎→灭菌→无菌检查(液体培养基的制备时不加琼脂)
2微生物实验室常用灭菌设备的使用
(一)  手提式高压蒸汽灭菌器 
(二)  干热灭菌箱
(三)紫外线灭菌室
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